生理学学生实验报告.docVIP

昆明理工大学医学院

生理学实验报告

(供临床医学专业使用)

实验一坐骨神经-腓肠肌标本制备

[1]实验目的

1.学习机能学实验基本的组织分离技术；

2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的方法；

3.了解刺激的种类。

[2]实验原理

蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在机能学实验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是机能学实验的一项基本操作技术。

[3]实验对象

蛙

[4]实验药品

任氏液

[5]仪器与器械

普通剪刀、手术剪、眼科镊(或尖头无齿镊)、金属探针(解剖针)、玻璃分针、蛙板(或玻璃板)、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器。

[6]实验方法与步骤

①破坏脑、脊髓

取蛙一只，用自来水冲洗干净(勿用手搓)。左手握住蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管(图3-1-1)。然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针2～3次，捣毁脑组织。如果探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感觉。

再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是，进针时有一定的阻力，而且随着进针蛙出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全，蛙下颌呼吸运动消失，四肢完全松软，失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动，退出椎管。如蛙仍有反射活动，表示脑和脊髓破坏不彻底，应重新破坏。

图2-1-1捣毁蟾蜍脊髓

①在操作过程中，应给神经和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响标本的兴奋性。

②标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟，使标本兴奋性稳定，再开始实验效果会较好。

[8]实验图像

[10]结果及分析

①捣毁脑脊髓后的蛙应有何表现？

②制备好的神经肌肉标本为何要放在任氏液中？

③如何判断制备的神经肌肉标本的兴奋性？

[11]思考题

①用各种刺激检验标本兴奋性时，为什么要从中枢端开始？

②刺激有几种形式?

实验二心脏灌流

[1]［实验目的］

1.学习蛙离体心脏灌流方法。

2.观察Na+、K+、Ca2+、H+、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。

[2]［实验原理］

心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境(如Na+、K+、Ca2+等的浓度及比例、pH值和温度)，而内环境的变化则直接影响到心脏的正常节律性活动。在体心脏还受交感神经和迷走神经的双重支配，交感神经末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力加强，传导速度加快，心率加快；迷走神经末梢释放乙酰胆碱，使心肌收缩力减弱，心肌传导速度减慢，心率减慢。将失去神经支配的离体心脏保持于适宜的理化环境中(如任氏液)，在一定时间内仍能产生自动节律性兴奋和收缩。而改变任氏液的组成成分，离体心脏的活动就会受到影响。

[3]［实验对象］

蛙

[4]［实验药品］

任氏液、0.65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000肾上腺素、1：10000乙酰胆碱

[5]［仪器与器械］

计算机生物信号采集与处理系统(或二道生理记录仪)、张力换能器、蛙类常用手术

器械一套、玻璃分针、蛙板、蛙钉、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、滴管(7支)、试剂瓶(

7个)、烧杯、双凹夹、万能支架、细线。

[6]［实验方法与步骤］

1.标本的制备?????

(1)离体蛙心标本制备(斯氏蛙心插管法)??取蟾蜍一只，打开胸腔，暴露心脏。在主动脉干下方穿双线，一条在左主动脉上端结扎作插管时牵引用；另一根在动脉球上方打一活结备用(用以结扎和固定插管)。玻璃分针将心脏向前翻转,在心脏背侧找到静脉窦,在静脉窦以外的地方做一结扎(切忽扎住静脉窦),以阻止血液继续回流心脏(也可不进行此操作)。

图3-4-1插管进入心室示意图

左手提起左主动脉上方的结扎线，右手持眼科剪在左主动脉根部(动脉球前端)沿向心方向剪一斜口，将盛有少许任氏液、大小适宜的蛙心插管由此开口处轻轻插入动脉球。当插管尖端到达动脉球基部时，应将插管稍向后退(因主动脉内有螺旋瓣会阻碍插管前进)，并将插管尾端稍向右主动脉方向及腹侧面倾斜，使插管尖端向动脉球的背部后方及心尖方向推进，在心室收缩时经主动脉瓣进入心室(见图3-4-1)。注意插管不可插得过深，插管的斜面应朝向心室腔，以免插管下口被心室壁堵住。

若插管中任氏液面随心室的收缩而上下波动，