梯度稀释涂平板制单菌落.ppt

梯度稀释涂平板制单菌落主讲：刘保平（副教授）单位：东北农业大学·生命学院年月：2014年9月地点：中国·哈尔滨

梯度稀释涂平板分离微生物画线分离梯度稀释倒平板改进的十倍梯度稀释涂平板制单菌落菌液稀释过程

菌液稀释过程图解菌液浓度=3000（活菌细胞/ml）容积V=1.5毫升No.3管1中平均有300活菌细胞管2中平均有30活菌细胞无菌水No.2No.1

未知浓度菌悬液十倍梯度稀释无菌水10-1M010-2M010-3M010-4M010-5M010-6M010-7M010-8M0

菌液接入平板-8-8菌液浓度=M010-1M010-2M010-3M010-4M010-5M010-6M010-7M010-8M0-8-8-7-7-7-7-6-6-6-6-5-5-5-5初始菌液

-5-5-5-5-6-6-6-6-7-7-7-7-8-8-8-8

倒置培养经常观察-5-5-5-5-6-6-6-6-7-7-7-7-8-8-8-8

-5-5-5-5-6-6-6-6-7-7-7-7-8-8-8-8000012128111011105107111121M02=10×（1+2+1+2）÷4×107=1.5×108M03=10×（8+11+10+11）÷4×106=1.0×108M01=10×（0+0+0+0）÷4×108=0（×）M04=10×（121+111+107+105）÷4×105=1.1×108

M02=10×（1+2+1+2）÷4×107=1.5×108M03=10×（8+11+10+11）÷4×106=1.0×108M04=10×（121+111+107+105）÷4×105=1.1×108M0=（M02+M03+M04）÷3=（1.5+1.0+1.1）÷3×108=1.2×10810接入平板的菌液是0.1ml，对应的浓度就要乘以10

M0=（M02+M03+M04）÷3=（1.5+1.0+1.1）÷3×108=1.2×108（单位？）（CFU/ml）初始菌液CFU=ColonyFormUnit

其他如：菌丝片段、芽孢、孢子囊、……单细胞+如上可能性→单菌落，单位统称为菌落形成单位，英文名称为：ColonyFormUnit，简称为CFU

改进的十倍梯度稀释涂平板制单菌落1菌液稀释过程2CFU概念3涂布平板及培养4数据处理5测定活菌数浓度61、分离纯化微生物