3.3蛋白质工程的原理和应用课件-高二下学期生物苏教版选择性必修3.pptx

第3节蛋白质工程的原理和应用第三章基因工程

从社会中来

回顾旧知转录DNARNA翻译肽链逆转录复制复制折叠等具有空间结构的蛋白质表达生物特有的功能或性状天然蛋白质的合成过程与性状表达血红蛋白的三级结构蛋白质只有具有一定空间结构，才能表达特有性状或具有特定功能

一、蛋白质工程崛起的缘由原则上只能产生自然界已存在的蛋白质（天然蛋白）基因工程的缺陷有时不完全符合人类生产和生活需要天然蛋白的缺陷对天然蛋白质进行改造，产生更符合人类需要的蛋白质蛋白质工程的作用

赖氨酸合成调控达到一定浓度两种酶的活性352位的苏氨酸变成异亮氨酸二氢吡啶二羧酸合成酶天冬氨酸激酶+104位的天冬酰胺变成异亮氨酸赖氨酸含量抑制提高提高限制提高对天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的改造

水蛭素是水蛭唾液腺分泌的凝血酶特异抑制剂，它有多种变异体，由65或66个氨基酸残基组成。水蛭素在临床上可作为抗栓药物用于治疗血栓疾病。为提高水蛭素活性，将47位的Asn（天冬酰胺）变成Lys（赖氨酸），使其与分子内第4或第5位Thr（苏氨酸）间形成氢键来帮助水蛭素N端肽段的正确取向，从而提高凝血效率。试管试验活性提高4倍，在动物模型上检验抗血栓形成的效果，提高20倍。水蛭素改造

人类蛋白质组计划?与蛋白质工程有什么关系?我国科学家承担了什么任务？

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。①基础：②操作：③操作对象：④目的：⑤地位：⑥理论和技术：蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系改造或合成基因改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类生产和生活的需求在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程基因分子生物学、晶体学和计算机技术二、蛋白质工程的基本原理

根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质分子结构进行设计改造，生产符合人们需求的、自然界中不存在的蛋白质。由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成。思考：为什么蛋白质工程改造基因而不是直接改造蛋白质？①蛋白质的高级结构十分复杂，直接改造难度大；②蛋白质是由基因编码的，改造了基因可以间接改造蛋白质；③基因可以遗传，蛋白质无法遗传；二、蛋白质工程的基本原理1.目标2.实质

预期功能生物功能设计推测改造或合成目的基因转录翻译mRNA折叠多肽链行使蛋白质（三维结构）预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列→合成新基因→获得所需要的蛋白质3.基本思路

根据改造蛋白质的部位的多少，对蛋白质的改造可分为三类：（1）大改：设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质；（2）中改：在蛋白质分子中替换某一个肽段或某一个特定的结构域；（3）小改：改造蛋白质分子中的几个氨基酸残基。

某多肽链的一段氨基酸序列是：丙氨酸色氨酸赖氨酸谷氨酸苯丙氨酸怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列?请把相应的碱基序列写出来。提示：丙氨酸（GCU、GCC、GCA、GCG)、色氨酸(UGG)、赖氨酸(AAA、AAG）、谷氨酸（GAA、GAG）、苯丙氨酸（UUU、UUC）。mRNA序列为：GCU（或C或A或G）UGGAAA（或G）GAA（或G）UUU（或C）DNA序列为：CGA（或G或T或C）ACCTTT（或C）CTT（或C）AAA（或G）GCT（或C或A或G）TGGAAA（或G）GAA（或G）TTT（或C）

三、蛋白质工程的一般过程获取基因和蛋白质的结构数据

确定目的基因的碱基序列后，怎样合成或改造目的基因？可人工合成目的基因或从基因文库中获取目的基因。对基因的改造经常会用到基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等。比较基因定点诱变基因突变相同点发生的过程结果不同点场所手段方向DNA复制过程中产生新基因，从而产生新性状生物体外生物体内定向改造不定向性PCR技术物理化学方法

预期功能降低胰岛素的聚合作用设计结构改变B链第20～29位氨基酸组成改造新胰岛素基因B28位脯氨酸替换为天冬氨酸或将它与B29位的赖氨酸交换位置推测序列转录mRNA翻译多肽链行使功能速效胰岛素类似物a.研发速效胰岛素类似物预期结构折叠等天然蛋白质易形成二聚体或六聚体阻碍胰岛素从注射部位进入血液，延缓了降血糖作用定点突变四、蛋白质工程的应用

b.延长干扰素体外保存时间天然干扰素不易保存改造新干扰素基因预期功能延长保存时间设计结构氨基酸替换一个半胱氨酸变成丝氨酸推测序列预期结构转录mRNA折叠翻译多肽链行使功能在-70℃下可以保存半年定点突变

c.制备人鼠嵌合抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多将小鼠编码抗体可变区的基因片段与