查锡良生物化学第二章核酸的结构和功能.pptVIP

核蛋白体的组成原核生物（以大肠杆菌为例）真核生物（以小鼠肝为例）小亚基30S40SrRNA16S1542个核苷酸18S1874个核苷酸蛋白质21种占总重量的40%33种占总重量的50%大亚基50S60SrRNA23S5S2940个核苷酸120个核苷酸28S5.85S5S4718个核苷酸160个核苷酸120个核苷酸蛋白质31种占总重量的30%49种占总重量的35%、其他小分子RNA及RNA组学snmRNAs除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(smallnon-messengerRNAs,snmRNAs)。snmRNAs的种类01核内小RNA02核仁小RNA03胞质小RNA04催化性小RNA05小片段干涉RNA06snmRNAs的功能07参与hnRNA和rRNA的加工和转运。08RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。RNA组学12核酸的理化性质ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid第四节12两性电离紫外吸收变性复性分子杂交++++++++带正电荷的核酸－－－－－－－－带负电荷的核酸兼性离子酸碱一．两性电离二．紫外吸收OD260的应用目录1.DNA或RNA的定量2.判断核酸样品的纯度OD260=1.0相当于50μg/ml双链DNA40μg/ml单链DNA（或RNA）20μg/ml寡核苷酸DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0三、DNA的变性(denaturation)定义：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。方法：过量酸，碱，加热，变性试剂如尿素、酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。变性后其它理化性质变化：OD260增高 粘度下降比旋度下降 浮力密度升高酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失5′端3′端3.核苷酸的连接核苷酸之间以磷酸二酯键连接形成多核苷酸链，即核酸。CGA二、核酸的一级结构定义核酸中核苷酸的排列顺序。由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。5′端3′端CGA书写方法目录AGP5?PTPGPCPTPOH3?5?pApCpTpGpCpT-OH3?5?ACTGCT3?第二节DNA的空间结构与功能DimensionalStructureandFunctionofDNADNA的二级结构-双螺旋结构DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义DNA双螺旋结构模型要点DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装DNA的超螺旋结构原核生物DNA的高级结构DNA在真核生物细胞核内的组装DNA的功能DNA的二级结构——双螺旋结构（一）DNA双螺旋结构的研究背景碱基组成分析Chargaff规则：[A]=[T],[G]=[C].A+G=T+C.种不同DNA组成不同.同一个体的不同细胞DNA相同.碱基的理化数据分析A-T、G-C以氢键配对较合理DNA纤维的X-线衍射图谱分析目录DNA双螺旋结构模型要点（Watson,Crick,1953）DNA分子由两条相互平行但走向相反的脱氧多核苷酸链组成，两链以-脱氧核糖-磷酸-为骨架，以右手螺旋方式绕同一公共轴盘。螺旋直径为2nm，形成大沟(majorgroove)及小沟(minorgroove)相间。12碱基垂直螺旋轴居双螺旋内側，与对側碱基形成氢键配对（互补配对形式：A=T;G?C）。01相邻碱基平面距离0.34nm，螺旋一圈螺距3.4nm，一圈10对碱基。02碱基互补配对TAGC氢键维持双链横向稳定性，碱基堆积力维持双链纵向稳定性。（三）DNA双螺旋结构的多样性目录二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装（一）DNA的超螺旋结构超螺旋结构(superhelix或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。正超螺旋(positivesupercoil)盘绕方向与DNA双螺旋方同相同负超