真核生物RNA转录后加工.ppt

真核生物RNA转录

及转录后加工;一、原核生物RNA的转录过程

二、转录终止的两种机制：

a.不依赖于ρ因子的转录终止

b.依赖于ρ因子的转录终止

三、顺式作用元件和反式作用因子

;一、真核生物RNA的转录

二、转录因子的构造与功能

三、真核生物RNA的转录后加工（重点）

a.首尾的加工

b.RNA的剪接

c.RNA的编辑

四、复习与讨论;真核生物RNA的转录;转录起始前复合物

(pre-initiationcomplex,PIC);（一）转录起始;RNA-polⅡ的转录因子;（二）转录延伸;RNA-Pol;5?------AAUAAA-;构成型转录因子（constitutivetranscriptionfactor)：在所有细胞中均有体现，不受外在信号原因的诱导，与启动子附近或远距离位点结合，控制转录起始复合物的组装，提高转录起始复合物的稳定性或活性。

诱导型转录因子（inducedtranscriptionfactor)：可以接受外在信号调整的转录因子。它们的体现受到环境和发育等信号的调整。;诱导型转录因子;转录因子与昆虫的发育调控;诱导型转录因子EcR调控昆虫的生长发育;这一特性使它们在研究蛋白互作方面具有广泛的应用（酵母双杂交）;酵母双杂交——蛋白质互作;蛋白质互作研究（酵母双杂交）;1.变化DNA的构象：使本来包埋在螺旋内部的启动子序列暴露出来，有助于与RNA酶的结合。例如：转录因子SW1/SNF、NURF依赖ATP改造核小体。;反式作用因子的蛋白残基与顺式作用元件的DNA碱基之间的共价结合。

;发生作用的蛋白残基一般有如下几种类型：HTH(helix-turn-helix)、锌指(zincfinger)、亮氨酸拉链（lucinezipper）等。;其构象包括2个α螺旋（helix），螺旋之间连接一种短肽。其羧基端的一种α螺旋直接与DNA大沟的碱基专一性结合，此外一种α螺旋则穿过大沟，与DNA发生非特异性结合。;锌指(zincfinger);例如：TFIIIA;亮氨酸拉链;RNA转录后加工;RNA的加工：真核生物的初级转录产物经内含子剪切，外显子连接，同步在其5’端和3’端进行修饰后才能成为成熟的mRNA，这个过程称为RNA的成熟或加工。;一、真核生物mRNA的转录后加工;1、3’端加尾;

多聚腺苷酸尾巴功能：

1、参与新生RNA的释放，增进转录终止；

2、参与前体mRNA3’端内含子的除去；

3、稳定mRNA；

4、影??翻译的效率。;ployA尾巴有助于维持mRNA的稳定性;5’端的一种核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸（m7Gppp）。mRNA5’端的这种构造称为帽子（cap）。;帽子构造;mRNA的5’加帽过程;5’帽子构造的功能：

1、能有效地封闭mRNA5’末端，以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解，增强mRNA的稳定。

2、5’端完整的帽子构造有助于第一种内含子的剪切。

3、它是成熟mRNA运出核孔所必须的构造，为翻译起始酶eIF4e识别mRNA的5’端提供重要信号；

4、与某些RNA病毒的正链RNA合成有关。（正黏病毒基因组自身不能转录合成mRNA的5’帽子构造，但可以从宿主mRNA中偷取帽子）;3、内含子的剪切（mRNA剪接）;真核生物构造基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又持续镶嵌而成，清除非编码区再连接后，可翻译出由持续氨基酸构成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。;外显子(exon)和内含子(intron);鸡卵清蛋白基因;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;内含子的分类;I型内含子的特性;详细机制参见P164(理解);II型内含子的特性;II型内含子的特性;详细机制参见P165;需要UsnRNA参与形成剪接体（P166）;snRNA通过碱基互补配对与内含子结合，形成复杂的二级构造，从而使内含子剪接位点在空间上互相靠近。;snRNA在mRNA内含子剪接中的功能：

识别5’剪接位点和分支点

将5’剪接位点和分子点聚结到一起

催化或协助催化RNA剪接和连接反应。;不一样类型内含子的分布和剪接方式（P167）;RNA的选择性剪接;mRNA的选择性拼接;C变为U;锥虫coxII基因的编辑;RNA编辑的生物学意义;1.RNA合成的基本特性是什么？

2.原核生物启动子位点有什么特性？

3.原核生物转录的过程？

4.原核生物转录终止的机制？

5.什么叫顺式作用元件和反式作用因子？

6.真核转录后加工有哪些？

7.RNA编辑有什么生物学意义？