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进出口化妆品中霉菌和酵母计数
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SN/T5584-2024
5培养基和试剂
5.1稀释液
5.1.1改良letheen肉汤;见附录A中A.1。
5.1.2大豆酪蛋白卵磷脂吐温80(SCDLP)液体培养基:见A.2。
5.2计数琼脂
5.2.1沙氏葡萄糖氧霉素琼脂(SDCA);见A,3。
5.2.2马铃薯葡萄糖氯霉素琼脂(PDA);见A.4.
6操作步骤
6.1概述
除有特别说明外,从样品的处理到接种培养基的时间不应超过20min.
6.2样品处理和稀释
待测的样品应在室温下保存,不要温育、冷藏和冷冻样品。稀释液用改良letheen肉汤或SCDLP液体培养基,样品的处理和稀释按照SN/T5075的规定执行。
6.3计数操作
6.3.1倾注法
根据对样品污染状况的估计,选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液,每个稀释度分别吸取1mL样品匀液加入两个无菌平皿内、同时取1mL稀释液加入无菌平皿作空白对照。
计数琼脂可用SDCA或PDA,将冷却至46℃左右的计数琼脂(可放置于46℃±2℃恒温水浴箱中保温)15mL~20mE,倾注到含有适宜稀释度的样品匀液平Ⅲ及空白对照的平皿中,水平方向转动平皿使其混合均匀
待琼脂凝固后,正置平板,置于28℃±1℃培养箱中培养,观察并记录培养第5天的结果。
6.3.2涂布法
取冷却至46℃左右的计数琼脂(可放置于46℃±2恒温水浴箱中保温)15mL~20mL,倾注在平皿中,待琼脂凝固后,将平板置于36℃±1℃培养箱中供干至表面凝结水消失。
根据对样品污染状况的估计,选择1个~3个适宜稀释度的样品匀液,每个稀释度分别吸取0.1mL样品匀液加到两个琼脂平板上,用无菌涂布棒涂布均匀。同时取0.1uL稀释液加到琼脂平板上进行涂布作空白对照。
正置平板,置于28℃±1℃培养箱中培养,观察并记录培养至第5天的结果
6.3.3膜过滤法
取冷却至46℃左右的计数琼脂(可放置于46℃±2℃恒温水浴箱中保温)15mL~20mL,倾注在平Ⅲ中,待琼脂凝固后,将平板置于36℃±1℃培养箱中烘干至表面凝结水消失。
对适合进行膜过滤法的样品如漱口水、香水等,取两片无菌混合纤维素酯微孔滤膜,分别置于两个灭菌的过滤器内。根据对样品污染状况的估计,每个滤膜上加入1mL样品或样品匀液,用100mL稀
40.0
1000mL
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