练习血红蛋白的提取和分离.ppt

第1页，共36页，星期日，2025年，2月5日思考1分离生物大分子的基本思路是什么？选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。思考2蛋白质的分离和提取的原理是什么？根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。第2页，共36页，星期日，2025年，2月5日一、基础知识：㈠凝胶色谱法（分配色谱法）：1、凝胶：一些微小多孔的球体（内含许多贯穿的通道，由多糖类构成如葡聚糖、琼脂糖）2、概念：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法第3页，共36页，星期日，2025年，2月5日3、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对（）的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程（），移动速度（），而（）的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在（）移动，路程（），移动速度（），相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。相对分子质量较小较长较慢相对分子质量较大凝胶外部较短较快第4页，共36页，星期日，2025年，2月5日用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质(D)A．路程较长，移动速度较慢B．路程较长，移动速度较快C．路程较短，移动速度较慢D．路程较短，移动速度较快4、具体过程第5页，共36页，星期日，2025年，2月5日第6页，共36页，星期日，2025年，2月5日相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的进行过程可表示为图中哪一个B第7页，共36页，星期日，2025年，2月5日㈡缓冲溶液：1、作用：能够抵制（）对溶液的（）的影响，维持PH基本不变。外界的酸或碱PH值第8页，共36页，星期日，2025年，2月5日2、缓冲溶液的配制3.为什么在本实验中实用缓冲溶液在血红蛋白整个实验室中用的缓冲液是磷酸缓冲液，目的是利用缓冲液模拟细胞内的PH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察（红色）和材料的科学研究（活性）第9页，共36页，星期日，2025年，2月5日㈢电泳：1、概念：指带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。2、原理：第10页，共36页，星期日，2025年，2月5日3.分类：琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。测定（）通常用SDS—聚丙稀酰胺凝胶电泳蛋白质相对分子质量第11页，共36页，星期日，2025年，2月5日使用SDS-聚丙烯酰胺电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于A电荷的多少B分子的大小C肽链的多少D分子形状的差异第12页，共36页，星期日，2025年，2月5日二实验操作蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理—粗分离—纯化—纯度鉴定第13页，共36页，星期日，2025年，2月5日思考人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是什么？鸡的红细胞具有细胞核，含有DNA，便于进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。第14页，共36页，星期日，2025年，2月5日选用红细胞作分离蛋白质的实验材料，下列是其优点的是(ABC)多A．血红蛋白是有色蛋白B．红细胞无细胞核C．红细胞蛋白质含量高D．红细胞DNA含量高第15页，共36页，星期日，2025年，2月5日1.样品处理血液血浆水分固体物质血浆蛋白无机盐磷脂葡萄糖等血细胞白细胞血小板红细胞（最多）血红蛋白（）90％第16页，共36页，星期日，2025年，2月5日1、样品处理（1）、红细胞的洗涤：（2）、血红蛋白的释放：（3）、分离血红蛋白溶液：第17页，共36页，星期日，2025年，2月5日分离血红蛋白溶液有机溶剂（无色透明的甲苯层）脂类物质（白色脂溶性物质沉淀层）血红蛋白溶液（红色透明液体）红细胞破碎物沉（暗红色沉淀物）第18页，共36页，星期日，2025年，2月5日2.透析(粗分离)a过程：b目的：c原理：除去样品中分子量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出，而大分子保留在袋内。第19页，共36页，星期日，2025年，2月5