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培训资料--肿瘤组织库的建立与管理.ppt

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肿瘤组织库的建立与管理

研究目的

探讨分子生物学研究中肿瘤库的建库条件,标本的采集、保存和质量控制,以及肿瘤库的信息化管理等有关问题,创立肿瘤组织标本库,保护和合理利用肿瘤的标本资源,为临床和科学研究人员,提供适宜数量的肿瘤标本促进肿瘤的研究。

目录

建库理论根底

材料与方法

结果

讨论

致谢

理论根底

一、建立组织库的三种模式

1.“银行〞模式

2.临床试验模式

3.前瞻性收集模式

理论根底

“银行〞模式的组织库:按照一定的标准化运转程序〔standardoperatingprocesseds,SOPs〕标准人体组织的收集、加工和储存。

组织标本形式:通常为低温冷冻组织或蜡块。

缺点:不能提供新鲜的、未被冰冻的人体组织,亦不能提供某些有特殊加工需求的组织样本。不能满足研究者对组织块的个性化需求。

优点:可向研究者提供大量的组织样本,并且这些组织均有相关的临床信息和流行病学信息。

理论根底

理论根底

前瞻性收集模式:研究者指定需要的组织类型,同时也制定出所需的组织采集、处理及储存方法。

缺点:没有现成的大量的组织标本以及临床资料,因为组织需要前瞻性的去收集。

优点:研究者能获得他们需要的组织样本,能够满足其研究的个性化需求。

理论根底

1.SpruesselA,SteinmannG,JungM,LeeSA,CarrT,FentzAJ,SpangenbergJ,ZornigC,JuhlHH,DavidKA.Tissueischemiatimeaffectsgeneandproteinexpressionpatternswithinminutesfollowingsurgicaltumorexcision.

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3.HuangJ,QiR,QuackenbushJ,DauwayE,LazaridisE,YeatmanT.Effecsofischemiaongeneexpression.

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2001;99:222–227.

理论根底

4.季加孚.北京大学临床肿瘤学院肿瘤标本库的建设[J].北京大学学报:医学版,2005,37(3):329—330.

5.张佳年,于颖彦,计骏.等.低温冻存时间对肿瘤组织生物大分子的影响[J].诊断学理论与实践2021,V01.8,No1

材料与方法

库房

生物样本库资源信息管理系统

主要设备

BRADY条码打印机

海尔-80℃冰箱

患者入院后行生物平安性检查。检测HIV以及嗜肝病毒HBV及HCV感染情况。HIV感染患者不列为采集对象。HBV及HCV感染者需在标本上明确注明。

尊重患者的知情权和隐私权,在向患者及家属介绍标本采集和使用目的,获得患者自愿签署知情同意书后,方可安排标本采集和数据录入。

组织采集

1、取血液标本,每例采集10ml〔不少于5ml〕,约10ml全血平均分装于红帽管〔不含抗凝剂,1管〕和紫帽管〔含2%EDTA抗凝剂,2管〕中。

2、红帽管用于别离血清,室温放置30分钟后离心;紫帽管用于别离血浆及淋巴细胞。

3、1500r/min离心10分钟,此时悬液分层,上层淡黄色为血清〔红帽管〕或血浆〔紫帽管〕,底层为红细胞,紫帽管中中层呈灰白色的为外周血淋巴细胞。

4、轻轻吸取淡黄色上层血清〔血浆〕放入1.5ml离心管中,每管200µl,共12管〔血清6管,血浆6管〕,做好标记。

5、新鲜抗凝血〔含2%EDTA抗凝〕去血浆后,按照1:1比例参加PBS液混匀。

6、15ml离心管内先参加3ml淋巴细胞别离液,后参加6ml稀释样品,注意参加样品要缓慢进行,不要冲破液面,影响离心效果。20±2℃下2000r/min离心20分钟。

7、离心后血样分四层,将移液管插入液面,轻吸灰白色的淋巴细胞层,放入另一15ml离心管中,注意吸取过程中防止吸入分层液和血浆。

8、按1:5的比例向淋巴细胞中参加PBS液,混匀洗涤,室温1000r/min离心10min。

9、弃去上清液保存底部沉淀,适用1.5mlPBS液吹打洗涤,置入标记好的1.5ml细胞冻存管中,高速离心机500r

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