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GrapheneOxide?PeptideNanocomplexasaVersatileFluorescenceProbeofProteinKinaseActivityBasedonPhosphorylation
ProtectionagainstCarboxypeptidaseDigestion报告人:蔡向东
1.ABSTRACTTraditionalmethodsofassessingkinaseacitivitiesGrapheneGrapheneOxide
EXPERIMENTALSECTIONRESULTSANDDISCUSSIONGraphiteoxide,staurosporine,forskolin,CKII,IBMX,PKA,CPY,H-89,BSA(NIUXUEQING),Tris,glycerol,DTT,EDTA,andTritonX-100,FITC-pep,FITC-Ppep,FITC-kemptideSynergyMxmultimodemicroplatereaderexcitationwavelengthof480nm,fluorescenceemissionwasscannedfrom500to700nm0102
FluorescenceQuenchingofFITCMoleculesandFITC-peptidebyGrapheneOxide
AFMtopographicimages(top)andheightprofiles(bottom)ofGO(A)beforeand(B)afterincubationwiththe10μMpeptidesubstrateofCKII.
Fluorescenceresponsesat520nmemissionof10μMFITC-labeledpeptide(S-pep)digestedbydifferentconcentrationsofCPYfor30minandthenmixedwithGO.HydrolyzationofPeptidebyCPY.
DetectionofProteinKinaseActivityandInhibition
MCF-7CellCultureandLysatePreparationMCF-7breastcancercells+amphotericinB+penicillin+FskandIBMX(DMSO)improvedBradfordproteinassaydyereagentkit+BSA
3Q
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