2025年保健食品毒理鼠伤寒沙门氏菌哺乳动物微粒体酶试验.pdfVIP

士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎?死而后已，不亦远乎?——《论语》

保健食品毒理鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验

1范围

本方法规定了Ames试验的基本技术要求。

本方法适用于评价保健食品的致突变作用。

本方法不适用于具有杀菌和/或抑菌作用的受试物，不适用于具有妨碍哺乳动物细胞复制系

统的受试物。

2原理

鼠伤寒沙门氏菌的突变型（即组氨酸缺陷型）菌株在无组氨酸的培养基上不能生长，在有组

氨酸的培养基上可以正常生长。但如在无组氨酸的培养基中有致突变物存在时，则沙门氏菌

突变型可回复突变为野生型（表现型），因而在无组氨酸培养基上也能生长，故可根据菌落

形成数量，检查受试物是否为致突变物。某些致突变物需要代谢活化后才能使沙门氏菌突变

型产生回复突变，代谢活化系统可以用多氯联苯（PCB）诱导的大鼠肝匀浆（S-9）制备的

S-9混合液。

3仪器

3.1实验室常用设备。

3.2低温高速离心机，低温冰箱（-80℃）或液氮罐，洁净工作台，恒温培养箱，恒温水浴，

蒸气压力锅，匀浆器等。

4试剂

培养基成分或试剂除说明外至少应是化学纯，无诱变性。避免重复高温处理，选择适当保存

温度和期限，如肉汤保存于4℃不超过六个月，其它详见下述各培养基及溶液说明。

4.1营养肉汤培养基

牛肉膏2.5g

胰胨(或混合蛋白胨)5.0g

去留无意，闲看庭前花开花落；宠辱不惊，漫随天外云卷云舒。——《幽窗小记》

氯化钠2.5g

磷酸氢二钾（KHPO·3HO）1.3g

242

蒸馏水500mL

加热溶解，调pH至7.4，分装后0.103MPa20min灭菌，普通冰箱保存备用，保存期

不超过半年。

4.2营养肉汤琼脂培养基：用作a．基因型鉴定的结晶紫敏感试验，抗氨苄青霉素和四环素

试验，紫外线敏感性试验。b．细菌活力鉴定。

琼脂粉1.5g

营养肉汤培养基100mL

加热融化后调pH为7.4，0.103MPa20min灭菌。

4.3底层培养基所需试剂及配制方法如下：

4.3.1磷酸盐贮备液

磷酸氢钠铵（NaNHHPO4H·O）17.5g

442

柠檬酸（CHOH·O）10.0g

6872

磷酸氢二钾（K2HPO4）50.0g

硫酸镁1)（MgSO·7HO）1.0g

42

加蒸馏水至100mL，0.103MPa20min灭菌。

注：1)待其他试剂完全溶解后再将硫酸镁缓慢放入其中继续溶解，否则易析出沉淀。

4.3.240％葡萄糖溶液

葡萄糖40.0g

加蒸馏水至100mL，0.055MPa20min灭菌。

4.3.31.5％琼脂培养基