蛋白电泳技术分子生物学检验技术生物化学检验教研室92课件.pptx

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分子生物学检验技术

蛋白电泳技术

实验步骤

PART04

实验步骤

制备

启动电源，开始电泳

染色，脱色

结果检测

一、浸泡

二、点样

用镊子取出浸透的薄膜，夹在两层粗滤纸内吸干多余的缓冲液，然后平铺在玻璃板上（无光泽面朝上）。在载玻片上滴一滴血清，点样器（用盖玻片的一边）在血清上蘸一下（可来回移动一次），再将点样器轻印在加样位置上（离边缘约2cm），使血清渗透到薄膜内，形成均匀的直线。

三、电泳槽的准备

根据电泳槽膜支架的宽度，裁剪尺寸合适的滤纸条。在两个电极槽中，各倒入等体积的电泳缓冲液，在电泳槽的两个膜支架上，各放两层滤纸条，使滤纸一端的长边与支架前沿对齐，另一端浸入电泳缓冲液中。

当滤纸全部润湿后，用玻璃棒轻轻挤压在膜支架上的滤纸以驱赶气泡，使滤纸的一端能紧贴在膜支架上，即为滤纸桥。

四、电泳

将点样后的薄膜使粗糙面（点样面）向下，点样端置于负极，贴在电泳槽支架的“滤纸桥”上，平衡5min。

打开电源，调节电压和电流强度。调节电压至110V左右，电流强度为0.4～0.6mA/cm薄膜条宽，电泳时间40分-50分。

五、染色

六、漂洗

分子生物学检验技术

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