3.1.1 重组DNA技术的基本工具课件(共32张PPT)人教版生物选择性必修3.pptxVIP

;【从社会中来】;基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物制品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。;【问题探究】基因工程理论基础的分析;基因工程的操作对象为基因，而DNA双螺旋的直径只有2nm，对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。

那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？

;2024/12/23;;一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”;;【小组合作】如图为限制酶BamHI的识别序列，每组有一环状DNA分子，一直链DNA分子，尝试用“分子手术刀”对它进行剪切;【练习1】：写出下列限制酶切割形成的黏性末端

BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________;;二、DNA连接酶——“分子缝合针”;;2024/12/23;【小组合作】拿出刚才“剪开”的两段DNA片段，尝试用“分子缝合针”把它们缝合起来;;三、基因导入受体细胞的载体——“分子运输车”;载体种类：;最常用的载体——质粒;【问题探究】分析归纳载体需要具备的条件

问题1：载体要与外源基因连接，需要具备什么条件？

问题2：要使携带的外源基因在受体细胞中稳定存在，载体需要具备什么条件？

问题3：我们用肉眼看不到载体是否进入受体细胞，为了便于筛选重组DNA分子，载体需要具备什么条件？;;;1．已知限制酶BamHI和BglⅡ的识别位点分别是-G↓GATCC-、-A↓GATCT-。下列有关说法错误的是（??）

A．上述两种限制酶切割出的末端只能用E.coliDNA连接酶进行“缝合”

B．限制酶的识别序列可能由4个、6个、8个或其他数目的核苷酸组成

C．若用两种限制酶同时切割目的基因和质粒，可提高重组质粒构建的成功率

D．上述两种限制酶切割出的末端之间相互连接后可能不会再被两种限制酶识别;2．下列有关限制性核酸内切酶的说法，正确的是（）

A．简称限制酶，化学本质是DNA

B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C．一种限制酶能在不同的切点上切割DNA分子

D．作用位点是碱基之间的化学键;3．CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术，Cas9蛋白能与人工设计的sgRNA形成复合体（如图）。利用该技术可以对DNA进行一系列的定向改造（向导RNA即sgRNA）。下列相关叙述错误的是（????）

A．Cas9蛋白属于限制酶，能切割目的基因的特定碱基序列

B．CRISPR/Cas9系统可应用于对人类遗传病的治疗

C．向导RNA识别序列发生错配可能会导致基因被错误剪辑

D．通过基因编辑技术引起的变异属于广义的基因重组;4．下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述正确的是（）

A．用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口，有2个磷酸二酯键被断开

B．T4DNA连接酶和E．coliDNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接

C．序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同

D．限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大;5．下列关于质粒的叙述，正确的是（）

A．细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的

B．质粒只有在导入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制

C．质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子

D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器;6．DNA连接酶是重组DNA技术中常用的一种工具酶。下列错误的是（????）

A．T4DNA连接酶既可连接互补的黏性末端，也可以连接平末端

B．能将单个脱氧核苷酸加到DNA片段的末端

C．能连接用同种限制酶切开的两条DNA片段，重新形成磷酸二酯键

D．化学本质是蛋白质，可被蛋白酶破坏