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DNA复制一般特征与酶学体系主讲人:徐单单
DNA复制一般特征01DNA复制的酶学体系02
01DNA复制一般特征
01DNA复制一般特征复制(replication)是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。复制亲代DNA子代DNA图1.DNA复制的过程
半保留复制(semi-conservativereplication)复制的高保真性(highfidelity)双向复制(bidirectionalreplication)半不连续复制(semi-discontinuousreplication)DNA复制的一般特征
概念:DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。1.半保留复制(semi-conservativereplication)(一)半保留复制、复制子、复制叉
密度梯度实验含重氮-DNA的细菌培养于普通培养液第一代继续培养于普通培养液第二代图2.DNA遵循半保留复制原则
(1)按半保留复制方式,子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致,即子代保留了亲代的全部遗传信息,体现了遗传的保守性。半保留复制的意义(2)遗传的保守性,是物种稳定性的分子基础,但不是绝对的。
2.复制起点(originofreplication,ori或O)DNA复制时总是从一个特定的位置开始,这一位置称为复制起点。多数是富含A·T配对的区域。富含A·T配对的区域经常处于开发与闭合的动态平衡之中,称为DNA的呼吸作用。3.复制子(replicon)两个相邻起始点之间的DNA片段,称为一个复制子。复制子是独立完成复制的功能单位。4.复制叉(replicationfork)
5’3’oriorioriori5’3’5’5’3’3’5’5’3’复制子3’图4.真核生物每个染色体上形成多个复制子。
5.复制终点(1)环状DNA复制终点——固定的复制终点(2)线状DNA复制终点——形成一个大分子串联体(多联体)。如噬菌体病毒。
大多数原核和真核生物复制时,DNA都是从固定起始点开始向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制。(二)复制方向(1)双向复制(bidirectionalreplication)(2)单向复制从特定的位置开始,单方向进行复制。
oriterABC图5.DNA复制起点及终点A.环状双链DNA及复制起始点B.复制中的两个复制叉C.复制接近终止点(termination,ter)
(三)半不连续复制3?5?3?5?解链方向3′5′3′3′5′半不连续性复制领头链(leadingstrand)随从链(laggingstrand)图6.DNA半保留复制的过程
顺着解链方向生成的子链,复制是连续行的,这股链称为前导链(领头链)。另一股链因为复制的方向与解链方向相反,不能顺着解链方向连续延长,这股不连续复制的链称为后滞链(随从链)。复制中的不连续片段称为岡崎片段(okazakifragment)。领头链连续复制而随从链不连续复制,就是复制的半不连续性。
02DNA复制的酶学体系
02DNA复制的酶学体系1.使DNA链解离的酶解旋酶单链DNA结合蛋白拓扑异构酶
(1)解旋酶(helicase)(DnaB蛋白):利用ATP供能,作用于氢键,使DNA双链解开成为两条单链当DNA双螺旋有单链末端或双链缺口时,解螺旋酶结合到此处,沿模板随复制叉方向移动,具有方向性,5’3’,3’5’两种方向
(2)单链DNA结合蛋白(singlestrandedDNAbindingprotein,SSB)在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整E.Coli中的SSB以四聚体形式存在,与DNA结合具有协同作用。
108局部解链后(3)DNA拓扑异构酶(DNAtopoisomerase)图7.拓扑异构酶作用示意图
图8.解链过程中正超螺旋的形成
拓扑异构酶作用特点既能水解、又能连接磷酸二酯键拓扑异构酶Ⅰ拓扑异构酶Ⅱ拓扑异构酶Ⅲ拓扑异构酶Ⅳ分类
切断DNA双链中一股链,使DNA解链旋转不致打结;适
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