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背景资料1972年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合,获得了第一个体细胞杂种。1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次获得了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种——“马铃薯番茄”。目前,已得到栽培烟草与野生烟草、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代,获得了有价值的新品系或育种上有用的新材料。《细胞工程》前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术,后者是分子水平上的生物技术01克隆多莉羊技术是水平上的技术,培育抗虫棉是水平上的技术。02细胞工程与基因工程相比:03细胞04分子05思考:062.1植物细胞工程植物组织培养2.1.1植物细胞工程的基本技术为什么已分化的植物组织或细胞能培养成完整植物体?什么是细胞的全能性?植物细胞具有全能性。已经高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能。12探究:在特定的时间和空间条件下,基因选择性的表达的结果。1生物的每一个细胞都有本物种的全套遗传物质,都有发育成完整个体的全套基因。2生物体内的细胞为什么没有表现出全能性,而是分化成不同的组织器官?3已分化的细胞为什么具有发育成完整个体的潜能?46.细胞表现全能性的条件有哪些?离体、营养物质、激素及其它适宜条件。5、大小:受精卵生殖细胞体细胞>>2)植物细胞>动物细胞3)1)受精卵的全能性最高4)分化程度低的细胞>分化程度高的细胞进行植物组织培养的条件条件:植物细胞要处于离体状态。给予一定的营养物质,如有机物(蔗糖、维生素、植物激素等)和矿质元素等。无菌条件:即保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。因为一旦感染微生物,它们就会快速繁殖,争夺营养,并且还会产生毒素,使培养物很快中毒死亡。适宜的环境条件,如适宜的温度和pH等。植物组织培养的培养基无机营养成分:C,H,O大量元素及部分微量元素有机营养成分含N物质:包括维生素和氨基酸碳源:2%—5%的蔗糖琼脂:起支持作用相关激素:生长素,细胞分裂素和赤霉素PH值:5.0-6.0模型构建请根据上面的实验过程,概括出植物组织培养技术的流程简图。植物材料(消毒)脱分化无菌接种、诱导愈伤组织再分化诱导试管苗移栽到大田,培养成正常植株强调几个概念:愈伤组织:一团没有结构和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。(2)植物细胞的脱分化:让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程。(3)脱分化的实质和结果分别是什么?实质:恢复细胞的全能性过程结果:形成愈伤组织植物细胞的再分化:脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。21在组织培养实验中,为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?防止杂菌污染,因为杂菌生长快,会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质,导致培养物迅速死亡。讨论离体的器官、组织或细胞如果不进行脱分化处理,能否培养成完整植物体?决定植物细胞脱分化、再分化的关键因素是什么?0102不能,细胞已经分化失去了分化能力。(4)在本实验中,切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分,原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下,胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花),是否也能培养成小植株,你能用实验的方法进行验证吗?胡萝卜的其他部分(如茎、叶、花)也能培养再生形成小植株,只是诱导愈伤组织比较困难。常用材料:茎尖、根尖、叶片和花药等一、植物组织培养的过程外植体愈伤组织根、芽植物体脱分化再分化(离体的,已分化组织或细胞)(未分化)(分化)幼芽或幼根?条件?特点?诱导培养基排列疏松、高度液泡化薄壁细胞团分化程度低去分化较易理论基础:细胞的全能性分化培养基依据细胞全能性原理,在无菌条件下,分离植物的器官、组织、细胞或原生质体(外植体),并在培养基上培养,在适宜的条件下使其长成部分或完整植株的技术。植物的组织培养名称过程结果生长调节剂光脱分化由外植体脱分化为愈伤组织形成排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞团生长素与细胞分裂素避光再分化由愈伤组织分化为幼苗或胚状体有根、芽或有生根发芽的能力生长素与细胞分裂素需光营养生长生殖生长发育成完整的植物体由根、茎、叶、花、果实、种子组成自身产生各种激素需光下列属于组织培养的是:花粉培养成单倍体植株芽发育成枝条根尖分生区发育成成熟
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