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香菇多糖的制备许祥博.ppt

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一、含义

•又称香蕈、椎耳、香信、冬菰、厚菇、花菇,英文名:

Lentinan。香菇是我国传统的著名食用菌,在世界上最早

人工驯化栽培。香菇营养丰富,味道鲜美,被视为“菇中

之王”。其中含

•香菇多糖

•有十多种氨基酸,其中有异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、

蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸等7种人体必需的氨基酸,还含

有维生素B1、B2、PP及矿物盐。

二、成分功能

香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有效活性成分,香菇

多糖中的活性成分是具有分支的β—(1—3)—D—葡聚糖,

主链由β—(1—3)—连接的葡萄糖基组成,沿主链随机分

布着由β—(1—6)连接的葡萄糖基,呈梳状结构。研究表

明香菇的活性多糖成分β—(1—3)—D—葡聚糖对抑制异

源的、同源的、甚至是遗传性的肿瘤都有效。

•分子式:(c6h10o5)n,分子量:40~80万。香菇的主要

成分是多糖类和不饱和脂肪酸,还含有大量的可转变为维

生素D的麦角甾醇和菌甾醇,经热水提取的香菇多糖可调

节人休内有免疫功能的T细胞活性,可降低甲基胆蒽诱发

肿瘤的能力。香菇对癌细胞有强烈的抑制作用,对小白鼠

肉瘤180的抑制率为97.5%,对艾氏癌的抑制率为80%。

香菇还含有双链核糖核酸,能诱导产生干扰素,具有抗病

毒能力。

•功能主治:不能手术或复发性胃癌、肝癌、膀胱癌,使用

本品能缓解症状,提高病人免疫功能,纠正微量元素失调。

•香菇含有水溶性鲜味物质,可用作食品调味品,其主要成

分是5-乌苷酸等核酸成分。香味成分主要是香菇酸分解生

成的香菇精(lentionione)。所以香菇是人们重要的食

用、药用菌和调味品。

三、服用注意事项

•1、目前尚未有用于早产儿、新生儿和婴幼儿的临床经验,

要慎重使用。

•2、虽然临床试验仅有很少数病人发生头晕、胸闷、面部

潮红等一过性反应,临床仍应注意过敏反应的可能性。

•婴幼儿

•3、加入溶剂后,要用力振摇,使完全溶解,即刻使用。

•4、应根据医生处方和遵照医嘱。

•5、本品和维生素C混合,会使溶液变浑浊,应避免混用。

四、实验原理

•在组织中,多糖多与蛋白质以共价相结合,所以在生化

产品制备工艺中,往往第一步多用酶降解蛋白质部分或

用碱使多糖—蛋白质间的键裂开,以促进多糖在提取时

的溶解。碱性提取可避免多糖中硫酸基团水解而破坏。

现多采用碱性提取的同时用蛋白质水解酶处理组织。提

取液中存在的蛋白质可用普通蛋白质沉淀剂使之沉淀,

也可用其他方法使变性沉淀,如适当调pH和加热等。

五、实验目的

•掌握水溶醇沉法分离多糖类化合物的原理和方法

六、实验步骤

•1、材料:香菇2、试剂:试剂:活性炭、氯仿、无水乙

醇、丙酮、乙醚、苯酚、浓硫酸、甘露糖、Sephadex

G100凝胶3、设备和仪器:水浴锅、抽滤装置、离心机、

分光光度计

七、操作步骤

•(1)多糖的提取取香菇10g,于组织捣碎机内粉碎,加

20倍量的水,90℃水浴加热30min,抽滤,得滤液,加活

性炭(1mg/ml),搅拌吸附1h,抽滤,得滤液,用氯

仿萃取(3次)以除尽蛋白质,萃余液中加无水乙醇,使

其乙醇最终浓度为80%,沉淀12h后,于离心机中离心

4000r/min30min,沉淀物分别用无水乙醇,丙酮,乙

醚洗涤3次,即得香菇多糖提取物。

•2)多糖提取SephadexG-100凝胶充分溶胀后装柱,用

蒸馏水平衡48h。取香菇多糖提取物溶于蒸馏水中,离

心去除不溶物,上清液上柱分离,用蒸馏水洗脱,洗脱

速度5ml/20min,200nm波长紫外检测,收集主要峰分,

冷冻干燥得白色香菇多糖,称重。

•3)香菇多糖分析检测定性分析-----苯酚-硫酸法苯酚-

硫酸试剂:苯酚3g,浓硫酸5ml,溶于95ml无水乙醇中,

喷后,110℃加入几分钟,糖显棕色定量分析-----分光

光度法

A制备标准曲线精密称取60℃干燥至恒重的甘露糖标

准品0.1g,置于100ml容量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释

至刻度,用移液管量取对照品溶液0、0.5、1.0、2.0、

2.5、3.0ml分别置50ml容量瓶中,加蒸馏水至刻度,在

各精密吸取1ml置于比色管中,准确移取8%苯酚溶液

1ml,快速加入浓硫酸5ml,置水浴中加热15min,取出

冷却至室温,橘黄色溶液从小到大逐渐加深,将溶液于

490nm波长的可见分光光度计处测定吸光值,

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