细菌的接种分离与鉴定.pptVIP

细菌的接种、分离与鉴定思路邵阳市第一人民医院检验科罗甫花需氧培养法（一般培养）适用于需氧菌和兼性厌氧菌培养。培养温度：37℃（采用恒温培养箱）。培养时间：18～24h。二氧化碳培养法适用于奈瑟菌属和布鲁菌属等苛养菌培养。可采用烛缸法、二氧化碳培养箱。常用细菌培养方法微需氧培养法适用于空肠弯曲菌、幽门螺杆菌等微需氧菌培养。可采用抽气换气法。厌氧培养法适用于专性厌氧菌培养。厌氧培养箱、厌氧袋、厌氧罐、疱肉培养法、硫乙醇酸盐法等。灭菌接种环沾取标本接种杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本灭菌接种环010203040506细菌接种的基本程序01热导法：从环的根部（靠近柄部）开始烧，通过热传导让接种环或针上带的菌慢慢受热，直至干燥，最后放在氧化焰（外层温度高）上彻底灭菌。02从还原焰开始法：（内层温度低），带菌的接种环或针直接置于此不会引起气溶胶喷溅，待完全干燥后再移至氧化焰部位彻底灭菌。带菌接种环的正确烧法接种方法平板划线法原则和目的：通过划线稀释细菌

获得单个菌落要领：

G划线均匀而细密，不重复。

充分的利用培养基的面积。

培养基不能划破。

GB培养时培养皿倒置。03倒放可以在某种程度上防止菌落蔓延，好形成单个菌落，利于计数02防止形成的冷凝水滴落在培养基上造成染菌01防止培养基的水分蒸发04防止外来的污染培养时培养皿倒置的原因平板划线法连续划线法此法多用于含菌量相对少，无菌部位来源的如血液，胸腹水，脑脊液等标本的细菌分离培养。此法多用于含菌量较多的粪便、脓汁等标本的细菌的分离培养。分区划线法（可分二区，三区和四区）第一区划线01灭菌接种环02第二区划线03灭菌接种环04第三区划线05灭菌接种环0601密集划线法

此法用于纸片药敏实验培养02密集划线法03用于药敏实验细菌在固体培养基中生长表现：大小（mm表示。1mm以内露滴状；1-2mm小菌落。2--4mm中等大菌落；4-6mm以上称大菌落或巨大菌落）

形状（圆形、不规则形）

边缘（整齐、锯齿状）

表面性状（光滑、粗糙、）

隆起度（扁平、隆起、中凸）

颜色及透明度（黄色、灰白、光泽、透明）

硬度（干燥、湿润、粘液）

溶血（在血培养基上的表现）试管培养基接种法琼脂斜面接种法该法主要用于纯种增菌及保存菌种，也可用于某些生化鉴定试验如双糖铁培养基的接种。斜面培养基”小指夹棉塞手执试管底露出斜面手执塑料杆处试管口离火焰1cm操作顺序：接种环灭菌勾取细菌取棉塞接种塞棉塞接种环灭菌标记培养。*