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DNA的合成
知识结构提要
DNA的合成DNA复制的
DNA的
合成
DNA复制的
基本规律
1.DNA以半保留方式进行复制
2.DNA复制从起点双向进行
3.DNA复制以半不连续方式进行
4.DNA复制具有高保真性
DNA复制的
酶学和拓扑学
DNA聚合酶
催化脱氧核苷酸
间的聚合
原核生物
DNA聚合酶
真核生物
DNA聚合酶
1.DNApolⅠ:①5?→3?聚合酶活性用于填补DNA片段间的间隙;②5?→3?外切酶活性用于切除引物和突变的DNA片段;③→5?外切酶活性起校读作用。
2.DNApolⅡ:兼有3?→5?外切酶和5?→3?聚合酶活性,因此可能主要参与DNA的损伤修复。
3.DNApolⅢ:酶活性最大,该酶兼有3?→5?外切酶和5?→3?聚合酶活性。
1.DNApol?具有引物酶活性,催化引物合成。
2.DNApol?具有外切酶活性,参与DNA损伤修复。
3.DNApol?参与线粒体DNA复制。
4.DNApol?催化子链延长,错配修复。
5.DNApol?填补引物空隙、修复填补缺口。
复制中DNA分子
拓扑学变化
1.DnaB利用ATP供能来解开DNA双链,为解旋酶。
2.DNA拓扑异构酶改变DNA超螺旋状态:拓扑异构酶Ⅰ切断DNA双链中一股链,使DNA解链旋转不致打结;适当时候封闭切口,DNA变为松弛状态。反应不需ATP。拓扑异构酶Ⅱ切断DNA分子两股链,断端通过切口旋转使超螺旋松弛。利用ATP供能,连接断端,DNA变为松弛状态。。
3.单链结合蛋白(SSB):稳定已解开的单链DNA。
DNA连接酶连接复制中产生的单链缺口:连接DNA链3?-OH末端和相邻DNA链5?-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA片段连接成一条完整的链。在真核生物需要消耗ATP,原核生物则需要NAD+。
原核生物DNA
复制过程
复制的起始
DNA链的延长
复制的终止:包括切除引物,冈崎片段的延长和连接
1.形成复制叉和引物
2.参与的酶及蛋白质:解旋酶、DNA拓扑异构酶、单链DNA结合蛋白和引物酶。
1.在DNA-polⅢ催化下,dNTP以dNMP的方式逐个加入引物或延长中子链的3?-OH上,使子链不断延长。
2.概念:前导链;后随链;冈崎片段
逆转录:以RNA为模板,合成与RNA互补的DNA的过程。
逆转录酶:①依赖RNA的DNA聚合酶活性;RNA水解酶活性;③依赖DNA的DNA聚合酶活性。
练习题
一、名词解释
1.半保留复制2.领头链3.随从链4.冈崎片段5.逆转录
二、填空题
1.生物体内DNA生物合成的方式主要包括、和,其中是主要方式。
2.DNA复制的特征包括、、和。
3.DNA合成的原料有、、和四种。
4.原核生物中DNA聚合酶有三种,分别为、和,其中是复制时起主要作用的酶。
5.真核细胞中DNA聚合酶至少有五种,分别是、、、和,其中是复制中起主要作用的酶,和参与校读和损伤修复。
6.参与DNA复制的主要酶有、、、和。
7.逆性录酶具多种功能,能催化;;。但逆转录酶没有外切酶活性,因此没有校读功能。
8.DNA复制中,子链的延伸方向是。
三、选择题
1.冈崎片段是指
A.复制完成后,冈崎片断被水解
B.由于复制和解链方向相反,因此在随从链生成
C.因为有RNA引物存在,故出现冈崎片段
D.冈崎片段是一段RNA引物
E.由于复制和解链方向相反,因此在领头链生成
2.DNA的半保留复制是指
A.只有一股链以5′→3′方向作模板B.两股链作模板,均以3′→5′方向
C.两股链均以5′→3′方向作模板D.只有一股链以3′→5′方向作为模板
E.一股链以3′→5′方向作为模板,另一股以5′→3′方向作模板
3.DNA复制模板是3′-TACGTA-5′其复制产物是
A.5′-AUGCAU-3′
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