结核病实验室生物安全及菌株运输省公开课一等奖全国示范课微课金奖.pptx

结核病试验室生物安全及菌株运输第1页

内容一、结核病试验室生物安全二、结核菌株或样本运输三、风险评定第2页

一、结核病试验室生物安全第3页

结核杆菌生物学性状1、结核杆菌为细长略带弯曲杆菌，约1-4×0.3-0.6μm，常聚集成团，牛型比人型略粗短；2、分枝杆菌属细菌细胞壁脂质含量较高，约占干重60%，尤其是其中大量分枝菌酸可影响染料穿入；3、普通用萋-尼（ZiehlNeelsen）抗酸性染色法，以5%石炭酸复红加温染色后能够染上，但着色后不易被盐酸酒精脱色；第4页

结核杆菌生物学性状4、若再加用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色，而其它细菌及背景中物质为蓝色；5、专性需氧，最适温度为37℃，低于30℃或高于42℃均不生长；营养要求较高，生长迟缓，首次分离需要营养丰富培养基。惯用有Lowenstein-Jensen培养基，内含蛋黄、甘油、无机盐和孔雀绿等。6、细胞壁脂质含量较高，影响营养物质吸收，故生长缓慢，在普通培养基中每分裂一代需要10多个小时，在人体内需24-36小时；第5页

结核杆菌生物学性状7、普通10-30天可见菌落生长，菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明；8、结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可预防菌体水分丢失，故对干燥抵抗力尤其强，沾附在尘埃上保持传染性8-10天，在干燥痰内可存活6-8个月；9、结核杆菌对湿热敏感，在液体中加热62-63℃后15分钟或煮沸即被杀死；第6页

结核杆菌生物学性状10、结核杆菌对紫外线敏感，直接日光照射数小时可被杀死，可用于结核患者衣服、书籍等消毒；11、结核杆菌抵抗力与环境中有机物存在有亲密关系，如痰液可增强结核杆菌抵抗力，因大多数消毒剂可使痰中蛋白质凝固，包在细菌周围，使细菌不易被杀死；12、5%石炭酸在无痰时30分钟可杀死结核杆菌，有痰时需要24小时；5%来苏儿无痰时5分钟杀死结核杆菌，有痰时需要1-2小时；第7页

结核杆菌生物学性状13、结核杆菌对酸（3%HCL）或碱（4%NaOH）有抵抗力，15分钟不受影响，可在分离培养时用于处理有杂菌污染标本和消化标本中粘稠物质；14、结核杆菌对1：75000结晶紫或1：13000孔雀绿有抵抗力，加在培养基中可抑制杂菌生长；15、结核杆菌对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡拉霉素、对氨水杨酸等敏感，但长久用药轻易出现耐药性，而吡嗪酰胺耐药性5%。第8页

试验室安全操作—标准1、试验室应按等级要求完善试验设施，如生物安全柜抽风排风功效、紫外灯消毒、生物安全柜内除菌滤膜定期更换等；2、普通试验室应注意气流方向，试验过程中尽可能防止强气流改变而产生气溶胶（如：人员走动等）；3、易产生气溶胶或出现溅出操作,如涂片、离心或其它操作，应在BSL-2试验室Ⅱ级生物安全柜中进行，并使用个体防护设备；第9页

4、尽可能降低使用注射器针头，试验中使用注射器时，用过针头切勿再重新入套或拔开注射器与针头，应直接放入锐气搜集器，以免划破皮肤造成接种感染；5、试验结束后，操作过程中全部可能与生物危险物接触或被污染试验器械或物品，能够高压必须进行高压消毒；6、试验中发生意外污染情况，应马上汇报。试验室安全操作—标准第10页

试验室安全操作-意外事故处理1、试验过程中，如标本或含标本前消化处理液被打翻，污染操作台或地面，应以吸满75％乙醇溶液卫生纸覆盖污染区，15分钟后卫生纸方可移去；2、试验过程中，如污染物溅落到身体表面，或有割伤、刺伤、烧伤、烫伤等情况发生，应马上停顿试验并进行紧急处理；更换被污染工作服，皮肤表面用消毒液清洗，伤口以碘酒及酒精消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗；3、被污染器械等马上浸泡于含氯消毒剂或75％乙醇等溶液中，试验完成后再进行高压消毒处理；4、假如发生气溶胶污染或大面积污染，应马上停顿试验并关闭试验室，对试验区域和试验室进行紫外灯照射消毒2小时以上；对污染区域进行空气熏蒸消毒。第11页

试验室安全操作-绝对禁止处理方法1、有可能造成污染面积扩大，如使用75％乙醇或甲酚皂液擦洗被污染区域；2、直接用火焰对未经任何处理污染地面、操作台、器械进行烧灼处理；3、使用消毒效果未经证实消毒剂进行消毒；4、使用低浓度消毒剂和紫外灯进行短时间、长距离照射消毒。第12页

试验室消毒与灭菌1、物理消毒：紫外线、高压灭菌2、化学消毒：乙醇、过氧乙酸、苯酚、含氯消毒剂3、注意事项第13页

物理消毒—紫外线1、紫外线对结核杆菌有一定杀灭作用，用辐射强度在100μw/cm2以上30W紫外线灯、相对湿度50%～70%条件下，照射40mi