动植物油脂 甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和甘油的测定 高效体积排阻色谱法（HPSEC）.pdfVIP

动植物油脂甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和甘油的测定高效

体积排阻色谱法（HPSEC）

1范围

本文件描述了用高效体积排阻色谱测定动植物油脂中甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯以及甘油的方

法。

本标准适用于以甘油一酯和甘油二酯为主要成分且含量10%、甘油三酯含量20%的动植物油脂产

品。

本文件不适用于脂肪酸链长范围较大的乳脂或油脂，因为短链脂肪酸的甘油二酯的分子量低于长链

脂肪酸的甘油一酯的分子量。

本文件适用于基于辛酸和癸酸的甘油酯混合物时，只能确定甘油一酯和甘油的含量。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

ISO661动植物油脂试样的制备（Animalandvegetablefatsandoils—Preparationoftestsample）

注：GB/T15687—2008动植物油脂试样的制备（ISO661:2003,IDT）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和甘油的含量

Contentsofmonoacylglycerols,diacylglycerols,triacylglycerolsandglycerol

在本文件条件下测定的甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯和甘油的质量百分含量。

4原理

将样品溶解在四氢呋喃(THF)中，所得溶液通过凝胶渗透色谱（GPC）使用THF作为流动相进行分

析，根据甘油酯和甘油的分子大小进行分离，检测器为示差折光检测器。

5试剂和材料

警告——请注意有关危险物质处理的规定。应遵循技术、组织和人身安全措施。

除非另有说明，所使用试剂均为分析纯。

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5.1四氢呋喃(THF)，用250μL/L的BHT稳定。

5.2标准物质

5.2.1甘油（≥99.5%）。

5.2.1甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯，可以购自sigma公司。

使用的标准品是甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯，其脂肪酸分布应尽可能与样品中存在的脂肪酸分

布相似。然而，甘油酯的组成并不一定要精确地再现。对于大多数样品，单棕榈酸酯和/或单硬脂酸酯

和/或单油酸酯、二棕榈酸酯和/或二硬脂酸酯和/或二油酸酯、三棕榈酸酯和/或三硬脂酸酯和/或三油

酸酯就足够了。

在本文件规定的条件下，甘油、甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯的响应因子一般是相同的，在大多

数情况下不需要使用定量参考溶液，可以使用峰面积百分比表征质量百分含量。当样品中甘油的含量3%

时，必须确定其响应因子，并在测试报告中说明。

6仪器和设备

常用的实验室设备，尤其是以下设备。

6.1分析天平，感量为0.1mg。

6.2容量瓶，10mL。

6.3移液器，5mL。

6.4超声波浴。

6.5HPLC/GPC泵。

6.6进样器，配备20μL的样品定量环。

6.7检测器，差示折光检测器（RI检测器）。

6.8GPC色谱柱组合，有效分子质量高达4000Da（例如，三根300mm×7,5mmPlgel色谱柱、5

μm、100Å）。

6.9柱温箱。

6.10数据处理系统。

7扦样

实验室收到的样品应具有代表性，并在运输或储存过程中未受损和变质。

采样不是本标准规定的内容，推荐采用ISO5555中的采样方法。

8试样制备

试样制备按GB/T15687进行。

取样之前，彻底混合样品以确保均匀，固体样品需完全熔化后混匀。

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9试验步骤

9.1样品溶液的制备

称取约100mg样品（精确到0.1mg）至10mL容量瓶中，样品浓度以mg/10mL计。用THF稀释至刻度

后，置于超声波浴中5min-10min。所得澄清溶液直接注入