酶促反应动力学(有方程推导过程).ppt

第31页，共82页，星期日，2025年，2月5日(二)可逆性抑制(reversibleinhibition)抑制剂与酶以非共价键结合，在用透析等物理方法除去抑制剂后，酶的活性能恢复，即抑制剂与酶的结合是可逆的。第32页，共82页，星期日，2025年，2月5日1.竞争性抑制(competitiveinhibition)(1)含义和反应式抑制剂I和底物S结构相似，抑制剂I和底物S对游离酶E的结合有竞争作用，互相排斥，已结合底物的ES复合体，不能再结合I。同样已结合抑制剂的EI复合体，不能再结合S。第33页，共82页，星期日，2025年，2月5日第34页，共82页，星期日，2025年，2月5日（2）特点：①抑制剂I与底物S在化学结构上相似，能与底物S竞争酶E分子活性中心的结合基团.例如，丙二酸、苹果酸及草酰乙酸皆和琥珀酸的结构相似，是琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂。第35页，共82页，星期日，2025年，2月5日②抑制程度取决于抑制剂与底物的浓度比、〔ES〕和〔EI〕的相对稳定性；③加大底物浓度，可使抑制作用减弱甚至消除。第36页，共82页，星期日，2025年，2月5日（3）竞争性抑制剂的动力学方程E+SESE+PE+IEIk1k2k3由米氏方程得：Km＝①Ki＝②〔E〕＝〔E〕t－〔ES〕－〔EI〕③〔E〕〔S〕〔ES〕〔E〕〔I〕〔EI〕ki第37页，共82页，星期日，2025年，2月5日解方程①②③得：〔ES〕=〔E〕t（1+）＋1Km〔S〕〔I〕Ki又因vi＝k3〔ES〕,代入上式得：Vi＝（1+）＋〔S〕Km〔I〕KiVmax〔S〕第38页，共82页，星期日，2025年，2月5日竞争性抑制剂双倒数曲线，如下图所示：有竞争性抑制剂存在的曲线与无抑制剂的曲线相交于纵坐标I/Vmax处，但横坐标的截距，因竞争性抑制存在变小，说明该抑制作用，并不影响酶促反应的最大速度Vmax，而使Km值变大。1vi＝（1+）KmVmax〔S〕1+Vmax1〔I〕Ki第39页，共82页，星期日，2025年，2月5日很多药物都是酶的竞争性抑制剂。例如磺胺药与对氨基苯甲酸具有类似的结构，而对氨基苯甲酸、二氢喋呤及谷氨酸是某些细菌合成二氢叶酸的原料，后者能转变为四氢叶酸，它是细菌合成核酸不可缺少的辅酶。由于磺胺药是二氢叶酸合成酶的竞争性抑制剂，进而减少细菌体内四氢叶酸的合成，使核酸合成障碍，导致细菌死亡。抗菌增效剂-甲氧苄氨嘧啶(TMP)能特异地抑制细菌的二氢叶酸还原为四氢叶酸，故能增强磺胺药的作用。第40页，共82页，星期日，2025年，2月5日磺胺药物的抑菌作用第41页，共82页，星期日，2025年，2月5日2.非竞争性抑制(non-competitiveinhibition)(1)含义和反应式抑制剂I和底物S与酶E的结合完全互不相关，既不排斥，也不促进结合，抑制剂I可以和酶E结合生成EI，也可以和ES复合物结合生成ESI。底物S和酶E结合成ES后，仍可与I结合生成ESI，但一旦形成ESI复合物，再不能释放形成产物P。第42页，共82页，星期日，2025年，2月5日第43页，共82页，星期日，2025年，2月5日（2）特点：①I和S在结构上一般无相似之处，I常与酶分子上结合基团以外的化学基团结合，这种结合并不影响底物和酶的结合，增加底物浓度并不能减少I对酶的抑制。②非竞争性抑制剂的双倒数曲线：有非竞争性抑制剂存在的曲线与无抑制剂的曲线相交于横坐标-1/Km处，但纵坐标的截距，因竞争性抑制存在变大，说明该抑制作用，并不影响酶促反应的Km值，而使Vmax值变小，如下图所示：第44页，共82页，星期日，2025年，2月5日非竞争性抑制Vi＝Vmax〔S〕(1+)〔I〕KiKm+()〔S〕1Vi＝（1+）〔I〕Ki×（