DB13T 721-2005 羊冻精制作技术规程.docx

B42

DB13

河北省地方标准

DB13/T721—2005

羊冻精制作技术规程

2005-09-20发布2005-09-20实施

河北省质量技术监督局发布

I

DB13/T721-2005

前言

本标准附录A为规范性附录。本标准由河北省畜牧局提出。

本标准由承德市畜牧研究所起草。·

本标准起草人：赵国军、郭建军、邱殿锐、宋树森、张会文、金晓东、杨秀敏、王青妹。

DB13/T7212005

羊冻精制作技术规程

1范围

本标准规定了羊冻精生产过程中冷冻精液(以下简称冻精)的规格与质量、制作程序、精子检查方法、冻精的包装、标记、贮存。

本标准适用于羊的冻精生产和贮存。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T4143牛冷冻精液

3术语与定义

下列术语和定义适用于本标准。3.1

精子密度

每毫升精液中的精子数。3.2

精子活力

37℃环境下直线前进运动精子占精子总数的百分比。3.3

精子顶体完整率

顶体完整精子占精子总数的百分比。3.4

精子畸形率

畸形精子占精子总数的百分比。3.5

精子存活率

在37℃环境下保存4h时直线前进运动精子占精子总数的百分比。3.6

细菌数

一剂量冻精解冻后经培养出现的细菌菌落数。

4器材设备

4.1仪器设备

显微镜、千分之一感量天平、精子密度测定仪、恒温箱、干燥箱、冰箱、水浴锅、冷冻槽、蒸馏水发生器等。

4.2主要器材

采精筒、内胎、集精杯、玻璃棒、烧杯、100mL容量瓶、量筒、温度计、纱布或专用滤纸。

4.3药物试剂

乳糖、果糖、柠檬酸钠、青霉素、链霉素、卵黄、甘油、双蒸馏水、无水乙醇、中性凡士林。

5规格与质量

5.1剂型

1

2

DB13/T721—2005

为细管剂型。

5.2剂量

每管0.25mL。

5.3质量指标

5.3.1解冻后精子活力不低于0.35。

5.3.2每剂量解冻后呈直线前进运动的精子数不低于3000万个。

5.3.3解冻后的精子畸形率不超过20%。

5.3.4解冻后的精子顶体完整率不低于40%。

5.3.5解冻后的精液无病原性微生物，每毫升中细菌菌落数不超过1000个。

5.3.6在5℃~8℃贮存时解冻后存活时间不少于12h,在37℃时不少于4h。

6制作程序

6.1种公羊选择

用于生产冻精的种公羊，其体型外貌和生产性能，均应符合本品种的种用公羊特等、一等标准。种公羊必须经过县以上畜牧行政主管部门鉴定。

6.2精液采集

6.2.1采精月龄

初次采精月龄一般为8月龄。

6.2.2采精次数

成年种公羊每周可采精2～3次；每次连续排精两回。

6.2.3采精过程

按附录A的方法进行操作。

6.2.4合格新鲜精液质量标准

精液呈乳白色稍带黄色；精子活力不低于0.60;每毫升精子密度不低于15亿；精子畸形率不高于15%。

6.3精液的稀释

6.3.1稀释保护剂的配制

a)称取柠檬酸钠2.97g,放入100mL双蒸馏水中过滤，再加入搅碎卵黄10mL,混合均匀。

b)量取a液41.75mL,加入果糖2.5g,甘油7mL,加青霉素50000IU,链霉素50000IU,混合均匀。稀释保护剂要现配现用。

6.3.2稀释比例

根据鲜精液的密度和活力确定相应的稀释比例。

6.3降温和平衡

稀释后的精液，采用逐渐降温法。在1h~1.5h内，使稀释精液的温度降到4℃~5℃后，并在4℃

冰箱内平衡2h～4h。

6.4冷冻精液制作

6.4.1制备冻精的操作室

符合GB4143的要求。

6.4.2冻精的器具

符合GB4143的要求。

6.4.3制作过程

参照GB4143的方法进行。

7质量检查方法

7.1精子活力检查

按照GB4143附录B.3的方法进行。

7.2精子密度检查

按照GB4143附录B.4的方法进行。

7.3精子畸形率检查

按照GB4143附录B.5的方法进行。

7.4冻精中细菌数的检查

3

DB13/T721—2005

按照GB4143附录B.5的方法进行。

7.5解冻后精子存活时间检查

细管解冻后，在5℃~8℃或