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生物技术中的基因工程实验技巧题库

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1.请首先在试卷的标封处填写您的姓名，身份证号和地址名称。

2.请仔细阅读各种题目，在规定的位置填写您的答案。

一、填空题

1.基因工程的基本操作步骤包括：基因的获取、目的基因的扩增、基因的重组、基因表达载体的构建和目的基因的检测与鉴定。

2.在基因克隆实验中，常用于检测目的基因插入质粒载体中的方法是DNA测序和Southernblotting。

3.基因表达载体的构建过程中，需要用到限制性核酸内切酶、DNA连接酶和DNA聚合酶等工具。

4.PCR技术的全称是聚合酶链式反应，其原理是DNA双链复制。

5.重组质粒的提取通常采用碱裂解法。

6.DNA分子杂交是指同源DNA单链与异源DNA单链在适当条件下形成的杂化双链。

7.Southernblotting和Northernblotting分别是用来检测DNA片段和RNA分子的方法。

8.在重组DNA技术中，常用于连接质粒和目的基因的工具酶是DNA连接酶。

答案及解题思路：

答案：

1.目的基因的扩增，目的基因的检测与鉴定

2.DNA测序，Southernblotting

3.限制性核酸内切酶，DNA连接酶，DNA聚合酶

4.聚合酶链式反应，DNA双链复制

5.碱裂解法

6.同源DNA单链，异源DNA单链

7.DNA片段，RNA分子

8.DNA连接酶

解题思路：

1.基因工程的基本操作步骤包括获取基因、扩增目的基因、重组基因、构建表达载体以及检测和鉴定。

2.在基因克隆实验中，通过DNA测序和Southernblotting方法可以检测目的基因是否插入质粒载体中。

3.基因表达载体的构建需要使用限制性核酸内切酶、DNA连接酶和DNA聚合酶等工具，以切割、连接和复制DNA。

4.PCR技术的全称是聚合酶链式反应，其原理是利用DNA双链复制原理，通过热循环来扩增特定的DNA序列。

5.碱裂解法是提取重组质粒的常用方法，通过改变DNA的溶解度来实现质粒的分离。

6.DNA分子杂交是指同源DNA单链与异源DNA单链在特定条件下形成的杂化双链，可用于检测基因的存在。

7.Southernblotting用于检测DNA片段，Northernblotting用于检测RNA分子，它们都是通过分子杂交技术来实现的。

8.DNA连接酶是连接质粒和目的基因的重要工具酶，用于在特定位置形成磷酸二酯键，实现DNA片段的连接。

二、选择题

1.基因工程中，获取目的基因的方法不包括：

A.聚合酶链反应（PCR）

B.人工合成

C.从基因文库中获取

D.重组DNA技术

答案：D

解题思路：基因工程中获取目的基因的方法主要包括PCR、人工合成和从基因文库中获取。重组DNA技术是用于将目的基因插入载体，而不是直接获取目的基因的方法。

2.以下哪项不是基因工程的基本操作步骤？

A.基因的获取

B.基因的复制

C.基因的重组

D.基因表达载体的构建

答案：B

解题思路：基因工程的基本操作步骤通常包括基因的获取、基因的重组和基因表达载体的构建。基因的复制是DNA分子的自然过程，不是基因工程的操作步骤。

3.PCR技术的优点不包括：

A.高效性

B.高特异性

C.简单易行

D.需要大量的模板DNA

答案：D

解题思路：PCR技术以其高效性、高特异性和简单易行著称，但并不需要大量的模板DNA，只需要微量的模板DNA即可进行大量扩增。

4.重组质粒的提取通常采用哪种方法？

A.酶解法

B.离心法

C.酶切法

D.亲和层析法

答案：A

解题思路：重组质粒的提取通常采用酶解法，通过特定的限制性内切酶切割质粒，以便进行后续的重组操作。

5.DNA分子杂交是指什么？

A.基因序列的比较

B.基因表达产物的分离

C.单链DNA与单链DNA的连接

D.单链DNA与双链DNA的连接

答案：D

解题思路：DNA分子杂交是指单链DNA与双链DNA之间的连接，这种连接通常用于检测DNA序列的相似性。

6.Southernblotting和Northernblotting分别是用来检测什么的方法？

A.质粒和DNA

B.基因和蛋白质

C.蛋白质和DNA

D.DNA和RNA

答案：D

解题思路：So