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金银花糖基转移酶基因的原核表达及其编码蛋白纯化

目录

金银花糖基转移酶基因的原核表达及其编码蛋白纯化（1）．．．．．．．．4

一、内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2研究目的和内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

二、文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

2.1金银花糖基转移酶的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.2原核表达系统的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.3蛋白质纯化技术概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

三、材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

3.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

3.1.1实验菌株和载体．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

3.1.2实验试剂和仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

3.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

3.2.1金银花糖基转移酶基因的克隆与构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

3.2.2原核表达系统的构建与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.2.3蛋白质纯化步骤．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

四、实验结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

4.1金银花糖基转移酶基因的克隆与构建结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

4.2原核表达系统的构建与优化结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

4.3金银花糖基转移酶蛋白的纯化结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

五、讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

5.1实验结果的分析与讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

5.2金银花糖基转移酶基因原核表达的影响因素分析．．．．．．．．．．．．18

5.3金银花糖基转移酶蛋白纯化方法的选择与改进．．．．．．．．．．．．．．20

六、结论与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

6.1主要结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

6.2研究的不足之处及改进建议．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

6.3金银花糖基转移酶在工业应用中的潜在价值．．．．．．．．．．．．．．．．23

金银花糖基转移酶基因的原核表达及其编码蛋白纯化（2）．．．．．．．24

内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

1.2金银花糖基转移酶的研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

1.3原核表达系统的选择理由．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

2.1.1宿主细胞．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

2.1.2表达载体．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

2.1.3培养基．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.1.4试剂和工具．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．