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2025/3/9第三章

色谱分析法第一节色谱法概述一、色谱法的特点、分类和作用二、色谱分离过程

2025/3/9第一节色谱法概述一、色谱法的特点、分类和作用1.概述2.分类3.特点二、气相色谱分离过程1.气相色谱分离过程2.分配系数K

2025/3/9一、色谱法的特点、分类和作用1.概述俄国植物学家茨维特在1906年使用的装置：色谱原型装置，如图。色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。

2025/3/9色谱法过程(以分配色谱法为例）当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础

2025/3/9Thinlayerchromatography(薄层色谱)Gaschromatography(气相色谱)Liquidchromatography(液相色谱)Supercriticalfluidchromatography(超临界流体色谱)FourmajortypesofChromatography2.色谱法分类

2025/3/9流动相为气体（称为载气）。按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱气相色谱：

2025/3/9液相色谱流动相为液体（也称为淋洗液）。按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。

2025/3/9液相色谱也包括尺寸排阻色谱法分离机理和分配色谱不同

2025/3/9其他色谱方法薄层色谱和纸色谱：比较简单的色谱方法高效毛细管电泳:九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。

2025/3/9色谱分离过程当试样由流动相携带进入色谱柱与固定相接触时，被固定相结合或吸附。随着流动相的不断通入，被结合或吸附的组分又从固定相中解结合或脱附，组分随着流动相向前移动时又再次被固定相溶解或吸附。随着流动相的流动，结合、解结合或吸附、脱附的过程反复进行。

2025/3/9分配系数K组分在固定相和流动相间发生的吸附、脱附，或溶解、挥发的过程叫做分配过程。在一定温度下，组分在两相间分配达到平衡时的浓度（单位：g/mL）比，称为分配系数，用K表示，即：右图以气相色谱为例

2025/3/9分配系数K的讨论试样中的各组分具有不同的K值是分离的基础；一定温度下，组分的分配系数K越大，出峰越慢；试样一定时，K主要取决于固定相流动相的性质；每个组份在各种固定相上的分配系数K不同；选择适宜的固定相可改善分离效果；某组分的K=0时，即不被固定相保留，最先流出。