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2022年高考生物总复习：微生物的实验室培养

1.培养基

(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养

基质。

(2)营养组成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外，还需要满足微生物

生长对pH、氧气以及特殊营养物质的要求。

(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。

2.无菌技术

(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。

(2)关键：防止外来杂菌的入侵。

(3)不同对象的无菌操作方法(连线)

3.大肠杆菌的纯化培养

(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

①操作步骤

计算→称量→溶化→灭菌→倒平板

②倒平板的方法及注意事项

a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。

b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。

c.丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。

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(2)纯化大肠杆菌的方法

①纯化培养原理：想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌

落，即可获得较纯的菌种。

②纯化大肠杆菌的关键步骤：接种。

③常用的微生物接种方法有两种

a.平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的

菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

b.稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液

分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

(3)菌种的保存方法

①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。

②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。

(1)(教材P16旁栏思考题解答)请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。

如果需要，请选择合适的方法。

①培养细菌用的培养基与培养皿

②玻棒、试管、烧瓶和吸管

③实验操作者的双手

提示①、②需要灭菌；③需要消毒。

(2)(教材P17“倒平板操作讨论”解答)

①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

提示通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

②平板冷凝后，为什么要将平板倒置？

提示平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，

将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠

落入培养基，造成污染。

3.下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请思考：

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(1)图甲是利用________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物

接种。这两种方法所用的接种工具分别是________和________；对这两种接种工

具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。

(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？

________________________________________________________________。

(3)下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解，其接种方法是________(填

“图甲”或“图乙”)。

提示(1)平板划线稀释涂布平板接种环涂布器灼烧灭菌(2)火焰附近

存在着无菌区域(3)图乙

1.(2016·全国课标卷Ⅰ，39)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉

降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气

中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配置培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题：

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②，该培养基中

的成分X通常是________。

(2)步骤③中，实验组的操作是_______________________________________

_________________________________________________________________。

(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组

的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。

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若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法________(填“正确”

或“不正确”)。

解析