组织切片染色技术.pptVIP

一、常规染色的概念在组织制片技术中，常规制片最广泛应用的是苏木精和伊红染色，称为常规染色（HE染色），又称普通染色。二、苏木素-伊红染色液的配制（一）苏木素染液的配制方法常用的有：1.哈瑞氏（harris）苏木素染液

最常应用染色时间为5min∽10min

配制

①蒸馏水1000ml

②苏木素3g∽5g

③碘酸钠1g

④钾明矾50g∽80g

⑤水醋酸20ml

其优点是：配后即可应用染色力较强。

其缺点是：极易产生金属膜沉淀。

01埃利希（Ehrlich），苏木素染液02配制03无水乙醇100ml04甘油100ml05苏木精2g06钾明矾2g∽3g07醋酸5ml∽10ml08置于阳光下自然氧化3个月左右成熟。09其优点是：染色结果甚佳，贮存愈久染色愈强，而且不需分色。二、苏木素-伊红染色液的配制配方：70％酒精99ml1％盐酸酒精，是最常用的分化液。浓盐酸1ml分化液二、苏木素-伊红染色液的配制氢氧化氨液：配方：浓氨水1ml蒸馏水99ml饱和碳酸锂液：配制：碳酸锂1g蒸馏水（冷）78ml流水冲洗还原。还原液二、苏木素-伊红染色液的配制01若在伊红液中加入0.5毫升冰醋酸，可加速其染色过程，并使胞质的色泽更为艳丽。配方：伊红Y（水溶）0.5g∽lg蒸馏水99ml若取用伊红Y（醇溶性）应溶于99ml75％或95％的乙醇中。020304伊红染液二、苏木素-伊红染色液的配制组织切片染色技术掌握：染色、常规染色的概念；HE染色的基本步骤。01熟悉：染色的目的、原理；常用染色术语；染色前后的处理；苏木素-伊红染色液的配制。02了解：染色的注意事项。03学习目标染色概述第一节就是利用染料在组织切片上给予颜色，使其与组织或细胞内的某种成分发生作用，经过透明后通过光谱吸收和折射，使其各种微细结构能显现不同颜色，这样在显微镜下就可显示出组织细胞的各种成分。染色是制片过程中的一个重要环节一、染色的概念将染料配制成溶液将组织切片浸入染色剂内经一定的时间，组织或细胞及其他异常的成分被染上不同深浅的颜色对光产生不同的折射率便于在光镜下观察。0304050102二、染色的目的染色的物理作用毛细管作用及渗透作用染色剂与组织细胞没有牢固的结合吸收作用：又称溶解学说。组织吸收染色剂，牢固的结合。组织的着色与溶液的颜色相同。三、染色原理细胞中各种蛋白质或胶体有不同的吸附面，因此能选择性地吸收不同的离子，即某种蛋白质对某种染色剂有吸附作用,而对别种染色剂无吸附作用，这就可以解释鉴别染色现象。02是固体物质的特性，即较大的物体能从周围溶液(染液)中吸附一些小颗粒(化合物或离子)到自身的特性。01吸附作用三、染色原理染色的化学作用染色剂按性质可分为酸性、碱性和中性染色剂，而动、植物的细胞内一般也可区分为酸性(阴离子)和碱性(阳离子)部分。当碱性染色剂溶液中的有色部分成为阳离子时，就能与细胞的阴离子(酸件部分)较牢固地结合，当酸性染色剂溶液中的有色部分成为阴离子时，就能与细胞内的阳离子(碱性部分)较牢固地结合。三、染色原理例如，细胞核（尤其是核内的染色质）主要由核酸组成，是酸性的组成成分，故和碱性染色剂(苏木精)的亲和力很强，易于着色。细胞质含碱性物质，故和酸性染色剂(伊红)的亲和力很大，易于着色。01进行性染色和退行性染色02进行性染色：组织成分着色由浅至深，当达到所需要的强度时，终止染色。03此种方法无需“分化”，例如，卡红染色。04退行性染色：是先把组织浓染过度，超过所需的程度，然后再用某些溶液脱去多余的染色剂，以达到适当的深度，并使不应着色的组织细胞脱色。05这个步骤称为“分化”。三、染色原理直接染色，间接染色和媒染剂间接染色：单独染料本身的水溶液或酒精溶液，几乎不能与组织细胞结合或结合的能力很弱，必须有第三种成分——媒染剂参与，才能使染色剂与组织细胞有效地结合起来。直接染色：染色无需