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2025-03-12 发布于广东
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橡胶树热诱导启动子的筛选及初步鉴定.docx

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橡胶树热诱导启动子的筛选及初步鉴定

橡胶树热诱导启动子的筛选及初步鉴定（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

内容概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

1.2研究目的和内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

1.3文献综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

2.1材料准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

2.1.1橡胶树品种介绍．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

2.1.2主要试剂与仪器．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

2.2.1热诱导启动子的提取．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

2.2.2启动子序列的克隆与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

2.2.3启动子活性的检测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

结果分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

3.1热诱导启动子的克隆与鉴定结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

3.1.1启动子克隆片段的获得．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

3.1.2启动子序列的生物信息学分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

3.1.3启动子活性的初步评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

3.2启动子功能验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

3.2.1启动子驱动报告基因表达的实验设计．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

3.2.2启动子驱动表达产物的分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

3.2.3启动子活性的定量分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

橡胶树热诱导启动子的筛选及初步鉴定（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

一、内容概览．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

研究背景及意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

研究目的与任务．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

研究现状及发展趋势．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

二、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

（1）橡胶树热诱导启动子的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

（2）初步鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

三、橡胶树热诱导启动子的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

筛选原理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

筛选流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27

（1）样品准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

（2）启动子捕获．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

（3）启动子初步分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29

筛选结果．．．．．．．．．．．．

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