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;;;;;;DNA连接酶;同两种限制酶切(双酶切);练一练;1.【2023年湖北卷】用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是()
A.若用HindⅢ酶切,目的基因转录的产物可能不同
B.若用PvuⅠ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因
C.若用SphⅠ酶切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否
D.若用SphⅠ酶切,携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落
;(2)某真菌的W基因可编码一种高效降解纤维素的酶,已知图中W基因转录方向为从左往右。为使放线菌能产生该酶,以图中质粒为载体进行转基因。表中是几种限制酶识别序列和切割位点。;;;;1.为使甘蓝具有抗除草剂能力,科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入甘蓝植株,获得抗草甘膦转基因甘蓝。(湖南长沙模拟);2.如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,具体流程如图(以EcoRⅠ酶切为例):;18.我国科学家欲获得高效表达萝卜蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药,进行了相关研究。检测发现,转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低,研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好,因此通过PCR对蛋白A基因进行了定点诱变,过程如图1所示。图2为生产该微生物农药所用的质粒结构示意图。图3为转基因大肠杆菌在培养基中的生长情况。据此回答下列问题:;;;
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