细菌的分布与分离接种.ppt

医学微生物学实验微生物学教研室2011年4月实验内容一、细菌分布实验空气中细菌的检查（操作）皮肤、日常物品细菌的检查（操作）二、细菌分离接种技术（操作）平板划线接种法；斜面培养基接种法液体培养基接种法；半固体穿刺接种法三、细菌在培养基上生长现象（示教）认识细菌在外界的分布规律掌握细菌分离培养基本技术认识细菌在不同培养基中的生长现象目的要求材料：培养基，普通琼脂平皿空气细菌检查材料：培养基，无菌生理盐水，75%酒精棉球，5%碘酒棉球，无菌棉棒皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查材料：培养基，无菌棉棒，酒精灯自来水中的细菌检查贰壹叁一、细菌的分布实验取三块琼脂平板，将2个打开皿盖分别置于不同的环境15~30min后，盖好皿盖。另外1个不启盖作为对照。置37℃培养18~24h。材料：普通琼脂平板方法：结果：计数菌落数，观察菌落数的差异。1.空气中细菌的检查(操作,4块/室)皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查方法在1个平皿底部做好标记，分为消毒前与消毒后两个区域。取一支无菌棉签放入无菌盐水中浸泡，在管壁上挤干水后擦拭皮肤或其他物品，然后将该棉签涂布于无菌平皿消毒前区域，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。将皮肤区域或物品用碘酒棉球及酒精棉球涂擦消毒，另取一支无菌棉棒用消毒前所述方法取材，接种于标有消毒后的平皿区域。平皿37℃、24h培养后取出观察表面有无细菌生长，比较消毒前后菌落数目，描述菌落特征。计数菌落数37℃×18~24h消毒前消毒后结果：01在1个平皿底部做好标记。02用酒精灯对水管口灭菌，拧开水管开关放水15S。03取一支无菌棉签蘸取自来水，将该棉签涂布于标有消毒前的无菌琼脂平皿表面，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。04将平皿于37℃、24h培养后取出观察平皿表面有无细菌生长，描述菌落特征。自来水中的细菌检查平板分離劃線接種法（操作）（一）分離培養半固體培養基接種法（操作）斜面培養基接種法液體培養基接種法（二）純培養細菌的接種法无菌操作接种环（上）和接种针（下）柄约22cm2—5mm绝缘柄约7.5cm金属柄约14.5cm5—8cm安装环(针)的螺口(约8mm)无菌操作Asepticarea10-20cm外焰焰芯内焰菌液采取法平板划线接种法（分离培养法）连续划线法②分段划线法IVIII1/5I1/10Rotate90?FlameloopRotate90?Rotate90?III1/4Flameloop（一）平板划线接种法（分离培养法）1培养结果2注意事项：3①②③区之间接种要灭菌4用力适当，不要划破琼脂表面5注意无菌操作（二）液体培养基接种法（二）液体培养基接种法用途：观察细菌动力，保存菌种。半固体穿刺接种法斜面培养基接种法（操作）用途：常用于扩大纯种细菌及实验室保存菌种。斜面培养基接种法液体培养基接种法