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职业教育医学检验技术专业教学资源库
生物化学检验技术
血清(浆)葡萄糖测定
BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE
2
1
标本采集与处理
空腹静脉血
随机静脉血
毛细血管全血
至少8小时无热量摄入,用于测空腹血糖
不受是否空腹影响,用于随机血糖测定
用于便携式血糖仪床旁检验
1
标本采集与处理
2
测定方法
按测定方法原理分类
Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性
邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等
无机化学法
有机化学法
特异性差
干扰因素多
试剂有腐蚀性,致癌性
酶法
GOD-POD法(常规)
HK法(参考)
GDH法
准确度、精密度、灵敏度好,适用于全自动生化仪
2
测定方法
葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸内酯+H2O2
2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物
红色醌类化合物在505nm有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡萄糖浓度成正比。
原理
1.葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)
2
测定方法
1.操作简单,特异性较高,是血糖测定的首选方法。
2.GOD-POD法,其准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自动生化仪。是我国临检中心目前推荐的常规方法。
3.GOD仅对β-葡萄糖高度特异性,对α-葡萄糖作用弱。延长孵育可使其变旋。
4.POD特异性较低,还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等可消耗H2O2,引起负误差(测定结果偏低)。但血液中上述物质浓度不高,对血糖测定影响不大。具有氧化剂作用的化合物参与反应,则可引起正误差。
5.严重溶血、脂血标本对结果有影响,干扰比色测定
方法学评价
2
测定方法
2.己糖激酶法(HK法)
原理
方法学评价
葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸+ADP
葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH
NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中葡萄糖浓度成正比
本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较昂贵。
2
测定方法
3.葡萄糖脱氢酶法(GDH法)
原理
方法学评价
(1)GDH对葡萄糖具有高度特异性,其测定结果与HK法具有良好的一致性
(2)一般浓度的抗凝剂或防腐剂及血浆中其他物质不干扰测定。但当血胆红素≥342μmol/L和血红蛋白≥1g/L时,可使测定浓度分别增高0.72mmol/L和0.22mmol/L。脂血标本会干扰测定,故须做标本对照管
NADH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中葡萄糖浓度成正比
3
参考区间
空腹血糖
3.9-6.1mmol/L
随机血糖
肾糖阈
<7.8mmol/L
8.9mmol/L
4
临床意义
1.血糖增高
4
临床意义
空腹性低血糖
*长期饥饿、剧烈运动
*内分泌疾病致胰岛素分泌绝对或相对过量
*严重肝脏疾病
*抗胰岛素的激素不足
反应性低血糖
功能性低血糖*
2型DM或糖耐量受损伴低血糖*
营养性低血糖*
2.血糖降低
4
临床意义
3.药物影响
噻嗪类利尿药
口服避孕药
儿茶酚胺
肾上腺素等
降糖药
抗组胺药
酒精
普萘洛尔等
引起血糖升高的药物
引起血糖降低的药物
课堂测验
1.下列关于GOD-POD法测血清葡萄糖不正确的是(多选题):
A.该方法为国内推荐的参考方法
B.血中尿酸、维生素C过高,易导致假阳性结果
C.该方法仅对β-葡萄糖高度特异性,对α-葡萄糖基本无作用
D.该法比色分析是基于Trinder反应生成醌类化合物,其比色波长多选用340nm
正确答案:ABD
课堂测验
2.血浆葡萄糖测定最常用的抗凝剂是:
A.EDTA
B.氟化钠-肝素钠
C.草酸钾-氟化钠
D.草酸钾-叠氮钠
正确答案:C
ThankYou
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