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生物化学检验技术职业教育医学检验技术专业教学33课件.pptx

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职业教育医学检验技术专业教学资源库

生物化学检验技术

血清(浆)葡萄糖测定

BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE

2

1

标本采集与处理

空腹静脉血

随机静脉血

毛细血管全血

至少8小时无热量摄入,用于测空腹血糖

不受是否空腹影响,用于随机血糖测定

用于便携式血糖仪床旁检验

1

标本采集与处理

2

测定方法

按测定方法原理分类

Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的还原性

邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等

无机化学法

有机化学法

特异性差

干扰因素多

试剂有腐蚀性,致癌性

酶法

GOD-POD法(常规)

HK法(参考)

GDH法

准确度、精密度、灵敏度好,适用于全自动生化仪

2

测定方法

葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸内酯+H2O2

2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物

红色醌类化合物在505nm有吸收峰,其吸光度增加在一定范围内与标本中的葡萄糖浓度成正比。

原理

1.葡萄糖氧化酶法(GOD-POD法)

2

测定方法

1.操作简单,特异性较高,是血糖测定的首选方法。

2.GOD-POD法,其准确度和精密度都能达到临床要求,操作简便,可用于自动生化仪。是我国临检中心目前推荐的常规方法。

3.GOD仅对β-葡萄糖高度特异性,对α-葡萄糖作用弱。延长孵育可使其变旋。

4.POD特异性较低,还原性物质如尿酸、维生素C、胆红素和谷胱甘肽等可消耗H2O2,引起负误差(测定结果偏低)。但血液中上述物质浓度不高,对血糖测定影响不大。具有氧化剂作用的化合物参与反应,则可引起正误差。

5.严重溶血、脂血标本对结果有影响,干扰比色测定

方法学评价

2

测定方法

2.己糖激酶法(HK法)

原理

方法学评价

葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸+ADP

葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH

NADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中葡萄糖浓度成正比

本法特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较昂贵。

2

测定方法

3.葡萄糖脱氢酶法(GDH法)

原理

方法学评价

(1)GDH对葡萄糖具有高度特异性,其测定结果与HK法具有良好的一致性

(2)一般浓度的抗凝剂或防腐剂及血浆中其他物质不干扰测定。但当血胆红素≥342μmol/L和血红蛋白≥1g/L时,可使测定浓度分别增高0.72mmol/L和0.22mmol/L。脂血标本会干扰测定,故须做标本对照管

NADH在340nm有吸收峰,其吸光度增加与标本中葡萄糖浓度成正比

3

参考区间

空腹血糖

3.9-6.1mmol/L

随机血糖

肾糖阈

<7.8mmol/L

8.9mmol/L

4

临床意义

1.血糖增高

4

临床意义

空腹性低血糖

*长期饥饿、剧烈运动

*内分泌疾病致胰岛素分泌绝对或相对过量

*严重肝脏疾病

*抗胰岛素的激素不足

反应性低血糖

功能性低血糖*

2型DM或糖耐量受损伴低血糖*

营养性低血糖*

2.血糖降低

4

临床意义

3.药物影响

噻嗪类利尿药

口服避孕药

儿茶酚胺

肾上腺素等

降糖药

抗组胺药

酒精

普萘洛尔等

引起血糖升高的药物

引起血糖降低的药物

课堂测验

1.下列关于GOD-POD法测血清葡萄糖不正确的是(多选题):

A.该方法为国内推荐的参考方法

B.血中尿酸、维生素C过高,易导致假阳性结果

C.该方法仅对β-葡萄糖高度特异性,对α-葡萄糖基本无作用

D.该法比色分析是基于Trinder反应生成醌类化合物,其比色波长多选用340nm

正确答案:ABD

课堂测验

2.血浆葡萄糖测定最常用的抗凝剂是:

A.EDTA

B.氟化钠-肝素钠

C.草酸钾-氟化钠

D.草酸钾-叠氮钠

正确答案:C

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