生物化学检验技术职业教育医学检验技术专业教学05课件.pptx

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生物化学检验技术

干化学分析技术

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指将液态样品如血浆、血清、尿液等置于含有试剂的固相载体上发生反应，依照反应结果定量测定样品中特定成分的浓度或活度的一项技术。

干化学分析

是一种专门使用固相载体试剂进行临床化学检验的分析仪，它通过反射光度法、差示电位法等方法定量测出样品中特定成分的浓度或活度。

干化学分析仪

干化学技术普遍采用多层膜固相试剂技术，即干式化学的多层膜试剂载体，它集中现代化学、光学、酶工程学、化学计量学和计算机技术于一体，已使其作为定量方法。

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一、干化学分析技术的基本原理

理论基础：遵从Kubelka-Munk理论

光反射率与固相层的厚度、单位厚度的光吸收系数以及固相反应层的散射系数有关系，当固相层厚度和固相反应层的散射系数固定时，光吸收系数同待测物的浓度成正比。

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（一）反射光度法

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多层膜干片结构

（1）样本扩散层

（2）反射层

（3）辅助试剂层

（4）试剂层

（5）透明支持层

基于反射光度法的多层膜干片结构示意图

反应过程演示

比色

展开层

试剂层

显色层

支持层

接收器

以血氨测定为例，氨干试剂片的有效成分是溴酚蓝,其它成分包括表面活性剂、缓冲成分和保湿剂。氨通过半透膜进入试剂层，与指示染料溴酚蓝反应产生颜色产物，其颜色强度也即吸光度与样品中氨含量成正比，由反射光度计在605nm进行吸光度检测，与经同样检测的氨校准品进行比较，得到样品中氨的浓度。血氨测定的分析参数很简单：样品10μl，反应时间5min，波长605nm。

基于传统湿化学分析的离子选择电极原理，用于测定无机离子。

（二）差示电位法

多层膜结构

（1）离子选择性敏感膜

（2）参比层

（3）氯化银层

（4）银层

（5）支持层

干化学自动分析仪已广泛应用于检验医学的各个方面，检测的项目已多达70余项，包括常规生化、内分泌激素、毒素、药物浓度分析以及特种蛋白等免疫学检验。

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二、干化学分析技术在临床检验中的应用

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干化学分析法的特点：

速度快，灵敏度和准确度与典型的分离式仪器相近；

应用Lambert－Beer定律时必须符合3个条件：

超微量，操作简单，占用空间小，使用过程中灵活机动性强。

脱离了传统的分析方法，所有的测定参数均存储于仪器的信息磁场块中；

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区别点

干化学

湿化学

试剂

固相，大多无需定标，稳定周期长（数月），全血可直接上机检测

液体，需要定标，稳定周期短，全血不可直接上机检测

仪器

磁卡校正，无需排水系统，分析前后无需清洗

每次测试原则上需要校正，需要排水系统，测试前后需清洁

反应载体

固相介质

反应杯

检测方法

反射光度法

透射光度法

电解质测定

差示电位法

离子选择性电极法

理论基础

Kubelka-Munk理论和Williams-Clapper公式

Lambert-Beer定律

干化学和湿化学生化检测的主要区别

1.仪器监测

2.校准频度

3.质控物

4.干片试剂的储存与使用

5.工作环境温度和湿度

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三、干化学分析技术的影响因素

ThankYou

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