T_QDIFST 001-2024 牛乳及牛乳制品中A1和A2型β-酪蛋白的测定 毛细管电泳法.docxVIP

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TB

团体标准

T/QDIFST001—2024

牛乳及牛乳制品中

牛乳及牛乳制品中A1和A2型β-酪蛋白的测定毛细管电泳法

DeterminationofA1andA2β-caseininbovinemilkanddairy

products-Capillaryelectrophoresismethod

2024-11-18发布2024-12-18实施

青岛市食品科学技术学会发布

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别专利

本文件的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由青岛市食品科学技术学会提出并归口。

本文件起草单位：青岛农业大学、山东得益乳业股份有限公司、青岛市畜牧兽医研究所

（青岛市畜牧工作站）、青岛农业大学海都学院、青岛新希望琴牌乳业有限公司、山东安牧

乳业有限公司、青岛荷斯坦奶牛养殖有限公司。

本文件主要起草人：杨永新、栾庆刚、王建华、于忠娜、刘佳、陈明君、王义坚、范荣

波、韩荣伟、姜洪宁、都启晶、邓春霞。

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牛乳及牛乳制品中A1和A2型β-酪蛋白的测定毛细管电泳法

1范围

本文件规定了毛细管电泳技术测定牛乳及牛乳制品中A1和A2型β-酪蛋白方法。

本文件适用于生牛乳、液态乳和乳粉中

本文件适用于生牛乳、液态乳和乳粉中A1和A2β-酪蛋白含量的检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期

的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括

所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

3.1

A1型β-酪蛋白A1β-casein

氨基酸序列第67位氨基酸为组氨酸的β-酪蛋白。

3.2

A2型β-酪蛋白A2β-casein

氨基酸序列第67位氨基酸为脯氨酸的β-酪蛋白。

4原理

乳中酪蛋白胶粒在尿素溶液中解离为蛋白质单体，在高压电场作用下，不同乳蛋白在羟

丙基甲基纤维素酸性缓冲液中的迁移速率呈现差异。基于A1型和A2型β-酪蛋白在分离过程

中的保留时间差异，通过紫外（或二极管阵列）检测器在波长214nm处进行检测。

5试剂或材料

除非另有规定，所用试剂仅为分析纯，

5.1水：GB/T6682，二级。

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5.21mol/L氢氧化钠溶液：称取4.00g氢氧化钠，加水溶解，转移至100mL容量瓶，定容。

5.31mol/L盐酸溶液：量取8.60mL浓盐酸，加水稀释，转移至100mL容量瓶，定容。

5.44mol/L磷酸溶液：量取24.60mL浓磷酸，加水稀释，转移至100mL容量瓶，定容。

5.58mol/L尿素溶液：称取96.10g尿素，加水溶解，转移至200mL容量瓶，定容。

5.6磷酸盐溶液：磷酸盐溶液（pH2.50±0.02）：称取磷酸二氢钠34.50mg、羟丙基甲

基纤维素

基纤维素12.50mg、量取尿素溶液（5.5）18.80mL，转移至25mL容量瓶，用磷酸

溶液（5.4）调节pH至2.50，定容。

5.7样品还原缓冲液（pH8.00±0.02）：称取柠檬酸三钠365.00mg、二硫苏糖醇190.00mg、量取尿素溶液（5.5）187.50mL，溶解于水中，用氢氧化钠溶液（5.2）调节pH至8.00，定容至250mL，混匀。

5.8A1型和A2型β-酪蛋白标准储备溶液（10mg/mL）：将A1型和A2型β-酪蛋白标准品按其纯度换算后称量，分别用样品还原缓冲液（5.7）定容至10mL。于-20oC保存，有效期1个月。

5.9A1型和A2型β-酪蛋白标准中间溶液（200mg/L）：分别准确移取A1型和A2型β-酪蛋白标准储备溶液200μL，用样品还原缓冲液（5.7）定容至10mL。现用现配。

5.10A1型和A2型β-酪蛋白标准系列溶液：准确移取一定量的标准中间溶液（5.9），用样品还原缓冲液（5.7）稀释定容，分别配制成A1型和A2型β-酪蛋白浓度分别为0.0