T_SATA 079-2024 果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺含量测定 高效液相色谱-串联质谱法.docxVIP

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团体标准

T/SATA079—2024

果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺含量测定高效液相色谱-串联质谱法

DeterminationofasparagineandglutamineinfruitsandvegetablesbyLC-MS/MS

2024-09-25发布2024-10-25实施

深圳市分析测试协会发布

I

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目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4原理 1

5试剂与材料 1

6仪器和设备 2

7分析步骤 2

8结果计算 4

9灵敏度、精密度 4

附录A（资料性）天冬酰胺和谷氨酰胺标准溶液及其内标的液相色谱-串联质谱图 6

II

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前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

本文件由深圳市计量质量检测研究院提出。

本文件由深圳市分析测试协会归口。

本文件起草单位：深圳市计量质量检测研究院、深圳市农产品质量安全检验检测中心、深圳深检集团医学检验实验室。

本文件主要起草人：肖伟敏、叶新玉、王奇、孙亮、李子樱、杨国武、赵云霞、唐淑军、孙丽萍、刘成文、陈欣、张玉鑫、黄城益、颜沁、朱泽超、林伟杰、孙胜男。

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果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺含量测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺的高效液相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于新鲜果蔬中天冬酰胺和谷氨酰胺的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T32465-2015化学分析方法验证确认和内部质量控制要求

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经灰色链霉菌蛋白酶酶解，并加入抗氧化剂丁基羟基苯甲醚处理，稀释后用液相色谱-串联质谱法测定，同位素内标法定量。

5试剂与材料

除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1甲醇（CH3OH）：质谱纯。

5.1.2甲酸（CH2O2）：色谱纯。

5.1.3乙醇（CH3CH2OH）：分析纯。

5.1.4浓盐酸（HCl）。

5.1.5丁基羟基苯甲醚（C11H16O2，BHA）。

5.1.6灰色链霉菌蛋白酶（XIV型；来源于灰色链霉菌）：酶活力≥3.5U/mg。

5.1.7三羟甲基氨基甲烷（Tris碱，C4H11O3N）。

5.2试剂配制

5.2.10.02%甲酸水溶液：吸取0.2mL甲酸至1L容量瓶中，定容至刻度，混匀。临用前配置。

5.2.2丁基羟基苯甲醚溶液（40mg/mL）：称取4.00gBHA，用乙醇溶解并转移至100mL容量瓶中，定容至刻度。临用前配置。

5.2.3蛋白酶溶液（52.5U/mL）：称取0.15g灰色链霉菌蛋白酶，用Tris缓冲液溶解并转移至10mL容量瓶中，定容至刻度。临用前配置。

5.2.4盐酸溶液（1.0mol/L）：移取8.3mL浓盐酸至100mL容量瓶中，加水定容至刻度。常温保存，

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有效期1个月。

5.2.5Tris缓冲液（0.05mol/L）：称取6.06g三羟甲基氨基甲烷于1000mL烧杯中，加水800mL溶解，用1.0mol/L盐酸溶液调节溶液pH至8.0±0.1，转移至1L容量瓶中，用水定容至刻度。4℃保存，有效期1个月。

5.3标准品

5.3.1天冬酰胺标准品（C4H8N2O3，CAS号：70-47-3）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.3.2谷氨酰胺标准品（C5H10N2O3，CAS号：56-85-9）：纯度≥99%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。

5.3.3天冬酰胺同位素内标（天冬酰胺水合物-15N2，C