B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗：制备工艺与免疫效力的深度剖析.docxVIP

B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗：制备工艺与免疫效力的深度剖析

一、引言

1.1研究背景与意义

禽偏肺病毒（Avianmetapneumovirus，aMPV），属于副黏病毒科肺病毒亚科偏肺病毒属，是引发禽类呼吸道疾病的重要病原之一。自1980年在南非首次被检测到以来，aMPV在全球范围内广泛传播，给养禽业带来了巨大的经济损失。我国于1999年首次从患有肿头综合症的鸡群内成功分离到aMPV，随后的血清流行病学调查及分子生物学研究表明，国内许多省份的种鸡场普遍存在禽偏肺病毒的感染情况，部分种鸡场血清阳性率甚至高达100%。

根据编码G蛋白基因的差异，禽偏肺病毒可分为A、B、C、D四个亚型。目前，国内已报道有A、B、C三种亚型的禽偏肺病毒，其中B亚型为主要流行亚型。aMPV感染禽类后，主要引起上呼吸道或中枢神经系统疾病，如鸡的肿头综合征（SES）、禽鼻气管炎（ART），火鸡的鼻气管炎（TRT）等。感染后的禽类常出现咳嗽、打喷嚏、流鼻涕、肿头、呼吸困难等症状，严重影响禽类的生长发育、产蛋性能和肉品质。同时，aMPV感染还会导致禽类免疫力下降，使其更容易继发感染其他细菌和病毒，如大肠杆菌、支原体、新城疫病毒等，进一步加重病情，增加死亡率，给养禽业带来更为严重的经济损失。

在我国，养禽业是农业的重要组成部分，对保障肉类供应、促进农民增收和农村经济发展具有重要意义。然而，B亚型禽偏肺病毒病的频繁发生，严重威胁着养禽业的健康发展。以2023年为例，国内部分地区因B亚型禽偏肺病毒病的爆发，导致肉鸡出栏率下降15%-20%，蛋鸡产蛋率降低20%-30%，直接经济损失达数十亿元。此外，为了控制疫情，养殖场需要投入大量的人力、物力和财力用于疫病防控、病禽治疗和病死禽处理，进一步增加了养殖成本。

目前，疫苗接种仍然是防控禽类疾病的重要手段之一。然而，由于aMPV病毒的分离难度较大，且在实际工作中，常因疾病发现及采样不及时、保存方式不当等因素导致分离失败，使得相关疫苗的研发进展缓慢。现有技术中的aMPV病毒亚单位疫苗制备过程繁琐，抗原的免疫效果不佳，难以满足养禽业对高效、安全疫苗的需求。因此，研发一种易于生产、安全性高、免疫效果好的B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗迫在眉睫。

本研究旨在通过对B亚型禽偏肺病毒的分离、培养、灭活及疫苗制备工艺的优化，研制出一种高效、安全的B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗，并对其免疫效力进行全面评价。该疫苗的成功研制，不仅能够为养禽业提供有效的防控手段，降低B亚型禽偏肺病毒病的发生率和危害程度，保障养禽业的健康发展，还能为其他禽类病毒病疫苗的研发提供技术参考和借鉴，具有重要的理论意义和实际应用价值。

1.2国内外研究现状

自1980年禽偏肺病毒在南非首次被检测到后，国内外学者对其展开了广泛研究。在病毒学特性方面，已明确aMPV属于副黏病毒科肺病毒亚科偏肺病毒属，其基因组为单股负链RNA，编码多种蛋白，如融合蛋白（F）、附着蛋白（G）等，这些蛋白在病毒的感染、致病过程中发挥关键作用。根据编码G蛋白基因的差异，aMPV被分为A、B、C、D四个亚型，不同亚型在致病性、抗原性上存在一定差异。

在流行病学研究上，aMPV在全球范围内广泛分布。在国外，欧洲、中东、美国等地均有该病毒的报道，且在火鸡和鸡群中造成了不同程度的发病和经济损失。在我国，1999年首次分离到aMPV后，血清流行病学调查显示许多省份的种鸡场普遍存在感染情况，部分种鸡场血清阳性率高达100%，其中B亚型为主要流行亚型。

在疫苗研究领域，灭活疫苗是防控aMPV的重要手段之一。国外在aMPV灭活疫苗的研发上起步较早，一些研究尝试通过优化病毒培养条件、灭活方法和佐剂配方来提高疫苗的免疫效果。例如，有研究使用特定的细胞系进行病毒培养，提高了病毒的滴度和产量；在灭活剂的选择上，对比了甲醛、β-丙内酯等不同试剂对病毒灭活效果和免疫原性的影响。然而，由于aMPV病毒的分离难度较大，且不同地区的病毒株存在一定的抗原差异，导致疫苗的通用性和免疫效果仍有待提高。

国内对于B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗的研究也取得了一定进展。天津瑞普生物技术股份有限公司发明了一种B型禽偏肺病毒灭活疫苗，其抗原为保藏编号为CCTCCNO:V202188的B型禽偏肺病毒RPVA0201株，该疫苗制备方法包括特定的油相和水相制备以及乳化工艺，克服了现有B型禽偏肺病毒灭活疫苗免疫保护力不佳的缺陷，且制备方法简单，易于规模化生产。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的研究团队针对B亚型禽偏肺病毒病灭活疫苗对商品蛋鸡和黄羽肉鸡的免疫保护效果进行了评价。研究选取21日龄的商