《蔬菜中丙环唑的快速检测方法 胶体金法》编制说明.pdf

附件2

江苏省农学会团体标准

《蔬菜中丙环唑的快速检测方法胶体金法》编制说明

一、标准编制背景

丙环唑是一种高效的三唑类杀菌剂，能防治多数高等真菌引起的病害，同时具有调节植

物生长的功能。近年来，由于同时具有较好的控旺压苗作用，农民为了控制菜心、普通白菜、

芥蓝等叶菜的外形，促进茎叶粗壮和叶色深绿，提高商品性能品质，大量地使用丙环唑等农

药，给蔬菜安全生产和食品安全带来潜在威胁。作为一种灵敏、快速、高通量的检测方法，

胶体金免疫层析法在丙环唑残留量的测定工作中日益受到关注，但至今未有相应的方法和标

准出台。起草单位在前期研究工作的基础上，从试剂和材料、试样制备、限量测定、测定条

件以及结果判断等方面制定蔬菜中丙环唑残留的免疫胶体金快速检测方法的标准，这对推进

蔬菜中丙环唑残留量的现场快速检测工作具有重要意义。

二、主要工作过程

针对已建立的菜心中丙环唑免疫层析检测方法，重点优化试纸条制备工艺和检测工作条

件。在此基础上组织有关专家对标准的格式、条款、涉及的内容等进行研讨，充分吸收前期

工作成果，并查阅相关的技术、标准资料，完成标准的征求意见稿。

三、标准编制原则及主要技术内容的确定

1标准编制原则

本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则》要求

进行编写。

2主要技术内容的确定

2.1方法原理

以硝酸纤维素膜为载体，胶体金为固相标记物，制作检测条。利用免疫测定中竞争法检

测原理，通过在检测区包被一定量的包被抗原，对照区包被羊抗鼠多克隆抗体，利用胶体金

标记的抗体与样品及检测区的物质之间的竞争反应，观测在试纸条的检测区和对照区呈现的

反应结果（试纸条出现色带），然后根据色带有无和颜色深浅，判断农药检出或超标。

2.2试剂材料

1

（1）丙环唑胶体金快速检测试剂盒中包括阳性参考品（达到检测限浓度的农药标品）、阴

性参考品（PBST）、甲醇、样品处理液（含10－20%甲醇的PBST）。检测试纸条用铝箔袋

密封包装。

（2）丙环唑标准工作溶液：根据需要用甲醇或样品处理液将丙环唑储备液（1000μg/mL）

稀释配制成适当浓度的标准工作溶液，供试纸条检测性能优化用。

2.3样品制备

（1）田间样品制备：在田间采集菜心样品100份。每份样品称取10g（精确至0.01g），

切碎后混匀，加入1mL甲醇，震荡后静置15分钟。加入5mL样品处理液，充分混匀后，利

用滤纸进行固液分离。滤液转移至10mL容量瓶并定容至10mL（样品处理液冲洗滤纸中的

样品），将作为待测液。

（2）添加样品制备：以检测限（0.5mg/kg）为关注浓度，在空白菜心样品中添加终浓

度为0.01、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0mg/kg的农药标准品，以无添加的空白基质提

取液作为对照，并按上述方法制备样待测液，用于试纸条检测性能优化。

2.4检测方法

将100μL检测液滴入试纸条取样端，待检液在层析作用下向检测试纸条的尾端侧向流

动。

反应8min，观察检测区和对照区的色带条数和颜色深浅。

同时对试剂盒内的阳性参考品、阴性参考品进行同样操作，以协助结果判定。

2.5结果判定

（1）读数仪测定法

按读数仪说明书要求操作直接读取并进行结果判定。

（2）目视法

对照阳性参考品和阴性参考品的测定结果，根据试纸条检测区（检测线）和对照区（控

制线）色带有无和颜色深浅，按照如下原则进行结果判定（图1）。对阳性样品或处于临界

值的“可疑阳性”样品，需重复检测两次以上，并用色谱方法进行确证。

表1检测试纸条检测结果判定表

结果判定判定依据

无效在对照区未出现色带，即控制线不显色

阳性仅在对照区出现一条红线，即检测线不显色

阴性在检测区及对照区各出现一条红线，即检测线和控制线均显色