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【多色案例23】24色多色流式深度检测人外周血免疫细胞免疫分型

Reference：OMIP-94Twenty-four-color(thirty-marker)panelfordeepimmunophenotypingofimmune

cellsinhumanperipheralblood.

OMIP是国际流式学会旗下CytometryPARTA杂志中的专栏，全称为：OptimizedMulticolor

ImmunofluorescencePanels。目的是为多色方案的科研人员提供素材，减少其方案的开发时间，提高实验效率。

一、实验信息

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二、配色方案

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三、圈门逻辑+流式图

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在排除粘连体后，根据CD45与SSC-B-A的性质对白细胞[1]进行门控。引入中性粒细胞和嗜酸性粒细胞

(CD45mid/low和SSC-B-Ahigh)。根据SSC-B-A和CD16的表达区分中性粒细胞和嗜酸性粒细胞[2]。根据CD177

的表达将中性粒细胞进一步细分。根据CD45表达和SSC-V-A区分单核细胞和淋巴细胞[2]。然后将单核细胞[3]分为

HLA-DR表达，并根据CD14和CD16表达分为经典(CD14+CD16-)、中间(CD14+CD16+/低)和非经典(CD14-CD16+)。

为了进一步分类树突状细胞(DC)[5]、先天淋巴样细胞(ILCs)[6]和嗜碱性细胞[7]、白细胞[4]，对

CD4-CD3-CD8-CD14-CD19-进行了圈门。树突状细胞[5]被鉴定为CD16-HLA-DR+。此外，基于CD123表达鉴定

浆细胞样DC(pDC)，基于CD11c表达鉴定髓细胞样DC(mDC)。在谱系阴性细胞中，根据CD127表达和CD56+ILCs

分类ILCs[6]。嗜碱性粒细胞[7]在谱系阴性细胞中被鉴定为CD123+CD38+细胞。

从淋巴细胞[2]门来看，确定的群体如下。在CD3-CD4-淋巴细胞[8]中，根据HLA-DR表达[9]进行细胞分层。在

HLA-DR-细胞中，基于CD16和CD56表达NK[10]，将细胞细分为CD16+CD56+(成熟NK细胞)、CD16+CD56-(早

期NK细胞)和CD16+CD56-(晚期NK细胞)。

此外，在成熟NK细胞中，估计了CD57的表达。B细胞[11]鉴定为CD3-CD4-CD16-HLA-DR+CD19+细胞。B

细胞进一步被门控为CD38+IgD-(浆母细胞)、CD38-IgD(记忆)和CD38-IgD。CD38-IgD+细胞进一步分为

CD27+IgD(边缘区B细胞)和CD27-IgD(初始)。使用另外两种标记CD24和CD38，将B细胞分为CD24highCD3ghigh

(Breg细胞)、CD24+CD38-(记忆B细胞)、CD24-CD38