T_NAIA 0338-2024 葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的测定 高效液相色谱-串联质谱法.docxVIP

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T/NAIA

团体标准

T/NAIA0338—2024

葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的测定高效液相色谱-串联质谱法

Determinationofbenzoicacid,sorbicacidanddehydroaceticacidinwinebyHPLC-MS/MS

2024-11-25发布2024-12-01实施

宁夏化学分析测试协会发布

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I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定编写。

本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区食品检测研究院（国家市场监督管理总局重点实验室（枸杞及葡萄酒质量安全））、吐鲁番市质量与计量检测所、宁夏化学分析测试协会。

本文件主要起草人：朱燕燕、马桂娟、汤丽华、马雪梅、马利伟、宋钰、王鹏、刘竞择、王琛、郭阳、刘继辉、吕毅、吴明、张小飞。

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葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了葡萄酒中苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸的高效液相色谱-串联质谱检测方法。本文件适用葡萄酒中苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经甲醇-水溶液（10+90，体积比）超声提取，提取液经分散固相萃取净化，用液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂和材料

5.1.1甲醇：色谱纯。

5.1.2乙酸铵：色谱纯。

5.1.3十八烷基硅烷键合硅胶（C18）：粒径40μm～60μm。

5.1.4乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）：粒径40μm~60μm。

5.1.5乙酸铵水溶液（5mmol/L）：称取0.385g乙酸铵，用水溶解并稀释至至1000mL，摇匀。5.1.6甲醇-水溶液（20+80，体积比）：量取200mL甲醇加入800mL水中，混匀。

5.1.7微孔滤膜（水相）：13mm×0.22μm，或相当者。

5.2标准品

苯甲酸（纯度：≥95%，CAS：65-85-0）、山梨酸（纯度：≥95%，CAS：22500-92-1）、脱氢乙酸（纯度：≥95%，CAS：520-45-6）。

5.3标准溶液配制

5.3.1标准储备溶液（1.0mg/mL）：准确称取约10mg苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸标准品，用水溶

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解并分别定容至10mL，0～4℃避光贮存，有效期6个月。

5.3.2混合标准储备溶液（10.0μg/mL）：吸取一定量的苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸标准储备溶液（5.3.1）于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，0～4℃避光贮存，有效期1个月。

5.3.3基质混合标准工作溶液：分别准确吸取混合标准储备溶液（5.3.2）适量，用空白样品基质溶液配制成浓度分别为10.0、20.0、50.0、100.0、200.0、500.0、1000.0、2000.0ng/mL，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源。6.2天平：感量0.1mg和0.01g。

6.3涡旋混合器。

6.4离心机：转速不低于8000r/min。6.5超声波震荡器。

6.6色谱柱：C18，2.1mm×100mm，粒径1.7μm或性能相当。

7分析步骤

7.1前处理过程

称取5g（精确至0.01g）葡萄酒样品于25mL容量瓶中，加入甲醇-水溶液（5.1.6）20mL，超声10min，用甲醇-水溶液（5.1.6）定容至刻度，摇匀备用。移取5mL上清液，加入至装有50mgPSA和100mgC18粉末的离心管中，涡旋2min，6000r/min离心3min，吸取上清液过微孔滤膜（5.1.7）后供液相色谱-串联质谱仪测定。

7.2仪器参考条件

7.2.1液相色谱参考条件

a）柱温：30℃。

b）流动相：A相为5mmol/L乙酸铵水溶液（5.1.5），B相