细胞破碎与固液分离技术.pptVIP

应用：大规模生物分离的主要过滤设备，用于较难分离的低黏度发酵液优点：Ａ、大规模，Ｂ、自动化、操作简单，Ｃ、滤布装卸容易、易保养维护。缺点：Ａ、占地大，单位体积利用率低，Ｂ、周期性中断进料、滤布利用率低，Ｃ、压力低，仅应用于低黏度发酵。预涂层真空转鼓过滤机一般用于含粘性杂质物料的连续过滤，其优点是杂质分离彻底、过滤速度快、劳动强度低和工作区环境好，其缺点是需消耗硅藻土助滤剂。用户因根据物料状况、生产规模及产品档次等诸多因素来综合考虑是采用预涂层真空转鼓过滤机还是板框压滤机。淀粉糖行业一般将其用于糖化液过滤以除去其中的不溶性蛋白。连续水平真空带式过滤机是一种自动化程度高的新型过滤设备，该机以过滤布或滤网为介质，使料浆水平布置于过滤介质之上，充分利用料浆重力和真空吸力实现固液分离。连续水平真空带式过滤机可适用于多种浓度条件下的物料，过滤效率高，因而被诸多工业部门优先采用。如何选择过滤器？过滤媒介其它要求过滤器类型滤液的澄清度颗粒大小的分布发酵液的黏度固体颗粒的浓度滤饼的干燥度滤饼的洗涤生产能力1234离心分离技术借助离心机旋转所产生的离心力，使不同大小和不同密度的物质分离的技术1细胞的收集、细胞碎片和沉淀的分离等常用离心分离2超速离心技术已成为分离、纯化、鉴别和各种生物大分子的重要手段之一3与哪些因素有关？颗粒的沉降速度与其自身质量、大小和密度相关。介质分子也会影响沉降速度，尤其针对小颗粒和作用力强的物质。固定角度水平重力同离心力相比可以忽略离心加速度：Stock’sForce(粘滞力)：离心沉降速度：分离因子定义Fr：离心力/重力加速度(g)的比值：意义：衡量离心设备的离心程度的重要技术参数，用于离心机的分类从Stokes公式可看出沉降速度与影响因素的关系：(1)密度差（?S-?l)越大，离心沉降速度越快;(2)在密度差（?S-?l)存在下,固体颗粒尺寸越大,越容易离心;(3)液体黏度?l越大，越不容易离心。(4)离心力(r?2)的大小对固液分离很有影响，细胞悬浮液或细胞匀浆中的颗粒尺寸都不大，与液相的密度差也不大，而且液体黏度常常较大，所以要通过增大离心力来提高分离效率。由于离心机半径(r)过大会造成不平衡和振动，一般高速离心机都采用增加转速来增大分离能力。沉降系数沉降系数为颗粒在单位离心力作用下的沉降速度。物理意义是颗粒在离心力作用下，从静止状态到达极限速度所经过的时间。RCF=1.118*10-5R(rpm)2相对离心力是指在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球引力的倍数。指在某一介质中使一种球形颗粒从液体的弯月面沉降到离心管底部所需要的离心时间。离心时间由实验要求和分离物质的特性决定。第二章细胞破碎与固液分离技术获取目的物质的先期步骤概述生物分离的第一步是将生物机体从发酵液中分离，通常使用过滤和离心等方法。01发酵细胞的代谢产物有的分泌到细胞或组织之外，还有许多是存在于细胞内部。02对于胞外产物只需直接将发酵液预处理及过滤，获得澄清的滤液，作为进一步纯化的出发原液。03对于胞内产物，则需首先收集菌体，进行细胞破碎，使代谢产物转入液相中，然后，再进行细胞碎片的分离。大多数情况下，抗生素、胞外酶、一些多糖及氨基酸等目标产物存在于在发酵液中。使胞内产物释放出来一般需要破碎细胞壁。细胞破碎的方法在生物化学领域中得到了很广泛的运用，但多数在小规模生产中，在大规模生产尤其是基因工程中应用极少。321目的破碎目的是使产物最大限度的释放出来01.同时，细胞破碎需要考虑对后期分离的影响。02.材料和产物的特性、提纯要求是选择破碎方法的依据。03.破碎方法的选择提取产物在细胞质内，用机械法破碎01提取产物在细胞膜附近，用化学法02提取产物与细胞膜或细胞壁结合，可采用化学法和机械法结合的方法03选择的一般原则多种破碎方法相结合可产生很大优势01菌种的培育及改造，胞内产物?胞外产物04对下游分离技术的影响：破碎颗粒清除，产物分离纯化02在上游发酵阶段，考虑到发酵过程和环境对破碎难易程度影响03破碎过程中应注意的问题细胞结构与破碎为了破碎细胞，必须克服的主要阻力是网状结构的共价键。01在用酶法或化学法来溶解细胞壁时，细胞壁的结构和组成显得特别重要，可用来作为选择溶菌酶和化学方法的依据。02机械法化学及生物化学法组织捣碎机、研钵、细菌磨高压匀浆、超声破碎、撞击法固体剪切作用液体剪切作