细胞斑点试验.pptVIP

LOGOLOGOT-SPOT.TB诊断结核感染

临床应用进展结核的现状结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约200万人死于结核。我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上。结核的传统诊断手段结核菌素皮试：低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。低特异性：与卡介苗接种和其他环境分枝杆菌有交叉，易造成“假阳性”结果。细菌学检查：常规培养：2月；快速培养：1周；阳性率取决于采集标本中细菌数量，不利于早期诊断。病理学检查：阳性率低，对取材标本有较高要求，有创伤，对肉芽肿性病变需进一步鉴别。1结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞3r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子2当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放r干扰素基于T淋巴细胞检测结核感染的原理T-SPOT.TB技术：基于T淋巴细胞检测结核感染的原理利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异抗原刺激释放r干扰素的T淋巴细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。基于T淋巴细胞检测结核感染的原理包基于T淋巴细胞检测结核感染的原理基于T淋巴细胞检测结核感染的原理T-SPOT.TB试验结果用每106PBMCs中斑点形成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106PBMCs02空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效01基于T淋巴细胞检测结核感染的原理T-SPOT.TB的临床意义T-SPOT.TB高灵敏度T-SPOT.TB的临床意义种类内容摘要受试者数量文献发表活动性结核/灵敏度将T-SPOT.TB的检测结果与最后通过涂片和培养确诊的结果进行比较。包括牛型结核杆菌和非洲型结核杆菌感染的患者。T-SPOT.TB的灵敏度为97.2%。（CI90.3-99.7%）72MeieretalEurJMicrobiolInfectDis(2005)；24:529-536在经培养确诊的活动性结核受试者中，T-SPOT.TB的灵敏度为96.6%。其中29例免疫力低下患者，T-SPOT.TB的灵敏度为100%87Leeetal.ERJ2006;28:24–30在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有临床症状和抗痨治疗有效）中，T-SPOT.TB的灵敏度为90.3%，并且不受CD4细胞数量影响。30Clarketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在经痰培养或肺部病变组织病理活检确诊的结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为92%。140KangetalChest.2007Sep;132(3):959-65在确诊的肺结核患者和疑似肺外结核患者中，T-SPOT.TB的阳性率94%。32Kimetal.ArchInternMed.2007;167;20:2255-2259在免疫力正常和免疫力低下的受试人群中，T-SPOT.TB的灵敏度分别为94%和95%。所有受试者中，42%为肺外结核患者。186Kimetal.AmJMed2009；122,189-195经培养确诊、抗痨治疗不超过2周的结核患者用T-SPOT.TB检测，阳性率98%（57/58）。58JanssensetalERJ2007；30(4):722-8在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为94%。32DominguezetalClinVaccImmunol2008;15;168-71在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为94.1%。270CheeetalJClinMicrobiol.2008;46(6):1935-40T-SPOT.TB的临床意义T-SPOT.TB高特异性ESAT-6＆CFP10均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域仅结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）存在RD1区基因卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因T-SPOT.TB不会受卡介苗接种影响LOGOLOGO