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发酵技术中菌体浓度与基质对发酵的影响及控制

1菌体浓度对发酵的影响

菌体（细胞）浓度(cellconcentration)：单位体积培养液中菌体的含量。

反映：菌体细胞的多少，而且反映菌体细胞生理特性不完全相同的分化阶段。

可据此算出菌体的比生长速率和产物的比生成速率等有关动力学参数。

菌体生长的影响因素

遗传特性。取决于细胞结构的复杂性和生长机制，细胞结构越复杂，分裂所需的时

间就越长。典型的细菌、酵母、霉菌和原生动物的倍增时间分别为45min、90min、

3h和6h左右，这说明各类微生物增殖速率的差异。

菌体的增长还与营养物质和环境条件有密切关系。各种碳源和氮源等成分和它们的

浓度。上限浓度、基质抑制（渗透压、关键酶）。一些营养物质的上限浓度(g／L)

如下：葡萄糖100、NH4+5、PO43-10。

影响菌体生长的环境条件有温度、pH值、渗透压和水分活度等因素。

菌浓的大小对发酵产物的得率的影响

在适当的比生长速率下，发酵产物的产率与菌浓成正比关系，即P=Qc(X)

Pm

P——发酵产物的产率(产物最大生成速率或生产率)，g／(L·h)；

Q——产物最大比生成速率，h-1；

Pm

c(X)——菌体浓度，g／L。

初级代谢产物：菌浓愈大，产物的产量愈大。

次级代谢产物：比生长速率μ比μ临略高一点的最适菌浓[即c(X)临]，菌体的生产

率最高。

菌浓过高会产生其他的影响：营养物质消耗过快，培养液的营养成分发生明显的改

变，有毒物质的积累，溶氧下降，会对发酵产生各种影响。

摄氧速率OUR与传氧速率OTR相平衡时的菌体浓度，即临界菌体浓度c(X)临。菌

体超过此浓度，抗生素的比生成速率和体积产率都会迅速下降。

２基质对发酵影响及其控制

据Monod方程，在分批发酵中菌体比生长速度是基质浓度的函数。在c(S)Ks的

情况下，菌体比生长速率与基质浓度呈线性关系。

基质过浓导致抑制作用。当葡萄糖浓度低于100～150g／L，不出现抑制作用；当

葡萄糖浓度高于350～500g／L，多数微生物不能生长，细胞出现脱水现象。

培养基过于丰富，菌体生长过旺，黏度增大，传质差，菌体不得不花费较多的能量

来维持其生存环境，即用于非生产的能量大量增加。

控制合适的基质浓度。

举例：基质浓度对生成量和组成的影响

黑曲霉柠檬酸发酵

蔗糖浓度15%~18%，蔗糖同化率97%

蔗糖浓度20%，只同化92%

蔗糖浓度低于10%，产柠檬酸少，积累草酸

蔗糖浓度低于2.5%，不产柠檬酸

营养物比例对发酵的影响

影响菌体按比例、均匀地吸收营养物和环境pH的稳定

影响菌体生长，影响产物量和组成

例：棒杆菌生产谷氨酸

+

NH过量，菌体增殖阶段会抑制菌体生长，产酸阶段Glu会受谷氨酰胺合成酶作用转化

4

为Gln

+

NH不足，-酮戊二酸积累，引起反馈调节

4

１）碳源对发酵的影响及其控制

迅速利用的碳源能较迅速地参与代谢、合成菌体和产生能量，并产生分解代谢产物，

有利于菌体生长，但有的分解代谢产物阻遏产物合成；

缓慢利用的碳源多数为聚合物，为菌体缓慢利用，有利于延长代谢产物的合成。例

如，乳糖、蔗糖、麦芽糖、玉米油及半乳糖分别是青霉素、头孢菌素C、盐霉素、

核黄素及生物碱发酵的最适碳源。

For青霉素：

现象：在迅速利用的葡萄糖培养基中，菌体生长良好，但青霉素合成量很少；相反，

在缓慢利用的乳糖培养基中，青霉素的产量明显增加。缓慢滴加葡萄糖以代替乳糖，

仍然可以得到良好的结果。

说明：糖的缓慢利用是青霉素合成的关键因素。乳糖被缓慢利用的速度恰好适合青

霉素合