DB32T 1798-2011 秤锤树组织培养繁殖技术规程.docxVIP

ICS65.020.40

B61

备案号：

DB32

江苏省地方标准DB32/T1798—2011

秤锤树组织培养繁殖技术规程

TechnicalRegulationsofmicropropagationforSinojackiaxylocarpaHu

2011-06-15发布2011-08-15实施

江苏省质量技术监督局发布

I

DB32/T1798—2011

前言

本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规定编写。

本标准由江苏省林业局提出并归口。

本标准起草单位：江苏省林业科学研究院。

本标准主要起草人：蒋泽平、黄利斌、窦全琴、张敏、蒋春。

1

DB32/T1798—2011

秤锤树组织培养繁殖技术规程

1范围

本标准规定了秤锤树组织培养繁殖中外植体选择与灭菌、初代培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、繁殖代数、炼苗移栽、移栽成活苗管理等要求。

本标准适用于秤锤树组织培养规模化繁殖。

2外植体选择与灭菌

2.1外植体选择

当年生健壮植株枝条或萌条的半木质化新梢长5cm～10cm。2.2外植体处理

将半质化枝条切割成每段2cm～3cm的带芽茎段。2.3外植体灭菌

枝条去叶毛，用软毛刷蘸液体皂轻刷干净，流水冲洗30min。将处理好的外植体在超净工作台上用70%酒精溶液浸泡30s～50s，然后转移至0.1%升汞溶液中消毒8min～10min，最后用无菌水冲洗3次~5次，接种于培养基中。

3初代培养

3.1培养基

MS基本培养基附加BA2.0mg.L-1+IBA0.05mg.L-1。3.2培养条件

温度25℃,光照强度2000lx，每日光照12h，培养40d后进入增殖培养。3.3接种

将经过灭菌的外植体，按芽朝上的方向插入培养基。

4增殖培养

4.1培养基

MS基本培养基附加BA1.0mg.L-1+TDZ0.05mg.L-1＋IBA0.05mg.L-1＋VC50mg.L-1＋S3%。4.2培养条件

2

DB32/T1798—2011

温度(25±2)℃,光照强度3000lx，每日光照14h。

4．3培养方法

在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。

5壮苗培养

5.1培养基

MS基本培养基附加BA0.5mg.L-1+TDZ0.05mg.L-1+IBA0.1mg.L-1+VC50mg.L-1＋S3%。5.2培养条件

温度(27±2)℃,光照强度3000lx，每日光照14h。5.3培养方法

在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。

6生根培养

6.1培养基

1/2MS（大量元素减半，其他成分不变）基本培养基附加NAA0.3mg.L-1+IBA0.5mg.L-1+VC

100mg.L-1＋S2%。6.2培养条件

温度(23±2)℃,光照强度3000lx，每日光照14h。6.3培养方法

培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时，开始炼苗。

7繁殖代数

连续繁殖25代～30代，不能继续繁殖。需取外植体重新接种培养。

8炼苗移栽

8.1移栽温室

温室使用前彻底消毒，用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3-4次，温室使用后3个月左右用来苏水消毒。8.2炼苗

在生根培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时开始炼苗，打开瓶口室内炼苗3d。8.3移栽基质

蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质。

3

DB32/T1798—2011

8.4移栽方法

先将试管苗取出，在流动的清水中冲洗。移栽至含有蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质的营养钵中。

8.5移栽条件

控制温度25℃~30℃,相对湿度85%-90%,保湿15d～20d,其间采用遮光率80%～90%遮光网遮荫,35d后成活。

9移栽成活苗管理

9.1大田栽植时间

试管苗移栽后60天大田栽植。9.2肥、水管理

移栽成活苗喷施0.5‰的N∶P∶K=1∶1∶2的复合肥营养液，10d追施1次；基质不宜太湿，以