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《鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体鉴别检测二重TaqMan实时荧光PCR法》编制说明.docx

《鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体鉴别检测二重TaqMan实时荧光PCR法》编制说明.docx

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团体标准《鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体鉴别检测二重TaqMan实时荧光PCR法》编制说明(征求意见稿)

一、工作简况

(一)任务来源

项目来源于广西标准化协会《广西标准化协会关于下达2022年第二十四批团体标准制修订项目计划的通知》(桂标协〔2022〕68号),由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心、田东县动物疫病预防控制中心、广西悦牧生物科技有限公司、广西大学、广西富凤农牧集团有限公司、广西金陵农牧集团有限公司、忻城县动物疫病预防控制中心、柳州市动物疫病预防控制中心共同负责编制任务。

(二)目的意义

支原体感染在家禽养殖中广泛存在,其中鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum,MG)和滑液囊支原体(Mycoplasmasynoviae,MS)危害最为严重。MG感染可引发鸡慢性呼吸道疾病,影响肉鸡胴体品质、种鸡生产性能,增加鸡群死淘率。MS感染则主要表现为关节积液、发炎,导致关节肿胀、变形、跛行、胸部囊肿,产蛋鸡产蛋减少、蛋壳畸形、鸡蛋品质下降等,降低经济效益。此外,MG和MS感染后可在整个鸡群循环,严重降低鸡群抵抗力,使其易并发或继发其他病原感染,加重症状甚至暴发其他疫病而造成更严重的损失。

目前,MG和MS感染已成为制约我国养禽业健康发展的最重要的疫病之一。在最新修订的《中华人民共和国动物防疫法》和《国务院办公厅关于促进畜牧业高质量发展的意见》(国办发〔2020〕31号)精神指导下,我国动物防疫已全面进入以净化、消灭为目标的新时期,抓好种源疫病净化,创建动物疫病净化场和无疫小区,是当前做好动物防疫的重点和重要抓手。自治区农业农村厅2020年下发了《自治区农业农村厅关于印发广西壮族自治区无规定动物疫病养殖场创建工作方案的通知》(桂农厅发〔2020〕44号),在全区布置开展规模化动物养殖场的疫病净化工作。

随着近年来MG和MS对我国养鸡业危害日益增大,中国动物疫病预防控制中心关于印发《动物疫病净化场评估管理指南(2023版)》《动物疫病净化场评估技术规范(2023版)》的通知,把支原体病列入国家级动物疫病净化场净化病种。国家已将支原体病的控制和净化工作提上日程,因此需进一步优化针对MG和MS的快速鉴别检测方法。对MG和MS的防控主要依赖检测、疫苗注射、药物治疗、阳性鸡隔离淘汰与净化等措施,而快速鉴别检测是有效防控、净化该病的前提和基础。目前,现有MG和MS的检测方法包括病原分离培养、血清学诊断及分子生物学诊断。其中病原分离培养因存在操作繁琐、工作量大、成本高、耗时长等问题,难以在基层单位广泛应用。血清学诊断由于MS和MG抗体之间存在交叉反应有可能出现误检的风险。分子生物学诊断相较前两种方法更适用于临床,尤其是TaqMan实时荧光PCR方法,具有特异性强、灵敏度高和重复性好等诸多优点。目前,国内已建立分别针对MG和MS的单重TaqMan实时荧光PCR方法,但这些方法无法同时检测并区分鸡群中的MG和MS感染。

本标准所涉及的MG和MS二重TaqMan实时荧光PCR检测方法,能同时检测并区分鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的二重TaqMan荧光定量PCR方法。相较于先前存在的分别针对MG和MS的单重TaqMan实时荧光PCR检测方法,本标准所规定的二重TaqMan实时荧光PCR检测方法在确保特异性强、敏感性高、耗时短的基础上,更具高效和经济的优势,实现一次检测可区分鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的目的。

二、编制简况

(一)成立编制工作小组

团体标准《鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体鉴别检测二重TaqMan实时荧光PCR法》项目任务下达后,主要起草单位制定了编制工作方案,由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心、田东县动物疫病预防控制中心、广西悦牧生物科技有限公司、广西大学、广西富凤农牧集团有限公司、广西金陵农牧集团有限公司、忻城县动物疫病预防控制中心、柳州市动物疫病预防控制中心等单位的专家和技术专业人员参加,成立了编制小组,并就编写工作进行了分工。

(二)标准主要起草人

姓名

职务/职称

工作单位

任务分工

郑敏

研究员

广西壮族自治区动物疫病预防控制中心

项目主持人,负责项目设计、协调、技术指导、修改、最终审核。

梁素联

副高级-高级兽医师

田东县动物疫病预防控制中心

负责标准起草,意见征询、修改、方法建立、复核、验证。

张江涛

未取得

广西大学

负责方法建立、修改、复核、验证

闭璟珊

副高级-高级兽医师

广西壮族自治区动物疫病预防控制中心

验证、修改、编制

韦正吉

副高级-高级兽医师

广西壮族自治区动物疫病预防控制中心

验证、修改、编制

辛佳亮

讲师

四川农业大学

验证、修改、编制

张红云

副高级-高级兽医师

广西悦牧生物科技有限公司

验证、修改、编制

雷磊

助理教授

广西大

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