诱导多能干细胞技术.pptVIP

*/tztg/201502/118286.htm*胚胎干细胞（embryonicstemcell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞。）胚胎干细胞是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。胚胎干细胞研究在美国一直是一个颇具争议的领域，支持者认为这项研究有助于根治很多疑难杂症，是一种挽救生命的慈善行为，是科学进步的表现。而反对者则认为，进行胚胎干细胞研究就必须破坏胚胎，而胚胎是人尚未成形时在子宫的生命形式。由胚胎来源的原始（未分化）细胞，它们具有分化成为众多特异细胞类型的潜能。**自细胞生物学和干细胞科学发展以来，科学家们一直试图通过细胞层面的研究，来了解疾病的发生和发展并治愈相关的病症。但是，由于疾病体外细胞模型的缺少，许多疾病的致病机理仍不清楚。同时，人类疾病相关的原代细胞的获取和体外培养十分困。但是，iPS技术的发展，为解决这些问题提供了一种有效的方式。人类疾病特异的iPS细胞的成功建立在2008年被首次报道。KevinEggan博士将一位患有ALS82岁老人的体细胞通过转入Yamanaka因子获得ALS病人特异的iPS细胞。这些iPS细胞可分化为运动神经元，且一定程度上继承了相关疾病的病理表型。*疾病相关的hiPS细胞研究虽然已在这些年里取得了重要的进展，但是其一些挑战。自人类hiPS细胞被诱导成功开始，生物学家们一直在优化iPS细胞的诱导方式，包括：重编程蛋白投递方式、人工合成的mRNA转染方式以及腺病毒，仙台病毒介导等。2012年ZhangXB博士采用episomal质粒电转的方式，从人脐带血中成功诱导获得了非整合型的hiPS细胞。这项研究提示了，个体外周血细胞可能也能够通过此种方式进行体细胞的诱导型重编程。****诱导多能干细胞技术

(inducedpluripotentstemcells,

iPSCells)杨通E-mail:内部资料，仅供参考总代理KAPABIOSYSTEMS,abm等北美优质工具酶（如二代测序）产品平台：iPS技术平台（外周血、尿液等非整合诱导及多种分化）CRISPR/Cas9基因编辑（敲除效率高，非整合）二代测序建库和数据分析（可做单细胞或极少量样本建库）特色技术平台：贰壹捷易生物重点任务科技部“十三五”重点专项干细胞与转化医学遗传相关疾病胚胎干细胞（embryonicstemcell，ESCs）01Wikipedia02体细胞重编程iPS细胞诱导多能干细胞（inducedpluripotentstemcells,iPScells）最初是日本人山中申弥（ShinyaYamanaka）于2006年利用病毒载体将四个转录因子（Oct4,Sox2,Klf4和c-Myc）的组合转入分化的体细胞中，使其重编程而得到的类似胚胎干细胞（ES）的一种细胞类型。人诱导多能干细胞（hiPS)研究简介Yamanaka,Cell.2009Rescuedbygenomeediting(CRISPR/Cas9,TALEN)iPSC-basedtherapy010203患者体细胞取材的创伤性。hiPS细胞诱导时外源基因的插入。细胞培养液中动物源性成份的使用。传统基因打靶的低效率。hiPS面临的挑战捷易的优势1—取材灵活（外周血、尿液）捷易的优势2—非整合型质粒电转（无整合）捷易的优势3—Xeno-free培养（无异源性物质）捷易的优势4—CRISPR/Cas9基因编辑特色：1）Cas9mRNA和sgRNA电转2）单链DNA做Doner3）Cas9蛋白和sgRNA电转RecoveryorConstructionofdiseasemodeliniPSCsPointmutationMulti-genemutationLargefragmentdeletionLargefragmentinsertion非整合型hiPS建系的周期及价格8万元建立病人特异iPS细胞模型（比较与正常的差异）；CRISPR/Cas9基因修复验证遗传突变的重要性；高通量测序寻找疾病机制疾病特异hiPS在遗传病疾病机制研究中的思路建立DISC1突变家系来源的iPS细胞系（包括正常和突变），并分化成神经元，比较差异；用基因编辑技术确认DISC1的作用；二代测序寻找机制Figure1|Normalneuraldifferentiation,