T_NAIA 0316-2024 枸杞原浆中类胡萝卜素的测定 高效液相色谱法.docxVIP

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枸杞原浆中类胡萝卜素的测定高效液相色谱法

DeterminationofcarotenoidsinWolfberryPulp—Highperformanceliquidchromatography

2024-10-02发布2024-10-20实施

宁夏化学分析测试协会发布

I

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》给出的规则起草。

本文件由宁夏回族自治区药品检验研究院提出。

本文件由宁夏化学分析测试协会归口。

本文件起草单位：宁夏回族自治区药品检验研究院（国家枸杞产品质量检验检测中心（宁夏））、中国科学院兰州化学物理研究所、宁夏回族自治区食品检测研究院、宁夏回族自治区药品质量控制与评价重点实验室。

本文件主要起草人：陈欢、马玲、撖志明、王宁丽、黄钰馨、姜文霞、吕毅、臧娅妮、孙莹、朱捷、刘淑瑛、马玉霞、平吉文、刘潇然、杨磊、马宗卫。

本文件为首次发布。

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枸杞原浆中类胡萝卜素的测定高效液相色谱法

1范围

本文件规定了枸杞原浆中类胡萝卜素成分的高效液相色谱测定方法。

本文件适用于枸杞原浆中类胡萝卜素成分：玉米黄质、β-胡萝卜素、β-隐黄素棕榈酸酯、玉米黄素双棕榈酸酯含量的测定，其他枸杞制品中类胡萝卜素含量的测定也可以参考本方法。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义

本文件没有需要规定的术语和定义。

4原理

试样中类胡萝卜素成分采用二氯甲烷提取，用0.1%BHT无水乙醇溶液稀释并定容，微孔滤膜过滤，高效液相色谱法测定，外标法定量。

5试剂与材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1无水乙醇（C2H5OH）：色谱纯。

5.2甲醇（CH3OH）：色谱纯。

5.3乙腈（CH3CN）：色谱纯。

5.4二氯甲烷（CH2Cl2）：色谱纯。

5.50.1%BHT无水乙醇溶液：称取0.1g二丁基羟基甲苯（BHT），以100mL无水乙醇溶解，混匀。

5.6玉米黄质（zeaxanthin，CAS号144-68-3）；β-胡萝卜素(β-carotene，CAS号7235-40-7）；

β-隐黄素棕榈酸酯(β-cryptoxanthinpalmitate，CAS号6081-47-6）；玉米黄素双棕榈酸酯（zeaxanthindipalmitate，CAS号144-67-2）。

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5.7标准溶液配制

5.7.1标准储备液

避光操作。准确称取各标准品适量，用二氯甲烷（5.4）溶解，分别配制成玉米黄质、β-胡萝卜素浓度为20μg/mL、β-隐黄素棕榈酸酯浓度为60μg/mL、玉米黄素双棕榈酸酯浓度为1.6mg/mL的标准储备液，-20℃下保存。

5.7.2标准使用液

避光操作，临用新制。分别精密量取标准储备液适量，以0.1%BHT无水乙醇溶液（5.6）作为溶剂，稀释制成玉米黄质、β-胡萝卜素浓度为0.1~2μg/mL、β-隐黄素棕榈酸酯浓度为0.3~6μg/mL、玉米黄素双棕榈酸酯浓度为8~160μg/mL的系列标准使用液，-20℃下保存。

6仪器与设备

6.1高效液相色谱仪（配紫外检测器）。

6.2分析天平，感量0.00001g和0.01g。

6.3冷冻离心机：转速不低于4000r/min。

6.4涡旋混合器。

6.5滤膜：0.45μm，有机相。

6.6离心管：50mL。

7分析步骤

7.1试样提取

取枸杞原浆样品，摇匀，准确称取5g（精确至0.01g），于50mL离心管中，加入二氯甲烷（5.4）20.0mL，涡旋混匀5min，以4000r/min离心10min，取下层溶液，经

0.45μm滤膜过滤，弃去初滤液，取2mL，置5mL容量瓶中，用0.1%BHT无水乙醇（5.6）稀释