DB37T 3086-2017 猪附红细胞体PCR检测技术　　.pdfVIP

ICS65.020.30

B41

DB37

山东省地方标准

DB37/T3086—2017

猪附红细胞体PCR检测技术

PCRAssayforDetectionofSwineEperythrozoon

2017-12-29发布2018-01-29实施

山东省质量技术监督局发布

DB37/T3086—2017

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由山东省畜牧兽医局提出。

本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。

本标准主要起草单位：山东省农业科学院畜牧兽医研究所。

本标准主要起草人：陈蕾、杜以军、齐静、丛晓燕、孙文博、陈智、郭立辉、于江、吴家强、李俊、

时建立。

I

DB37/T3086—2017

猪附红细胞体PCR检测技术

1范围

本标准规定了猪附红细胞体PCR检测技术的操作要求

本标准适用于猪附红细胞体的实验室诊断、监测和流行病学调查等。

2实验室生物安全要求

实验室必须为生物安全Ⅱ级(BSL-2级)及以上实验室。

3规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

4术语与定义

下列术语与定义适用于本标准。

4.1

PCR

聚合酶链式反应。

4.2

SDS

十二烷基硫酸钠。

5仪器设备和试剂

5.1仪器设备

5.1.1微量移液器(最大量程分别为10μL、20μL、100μL、1000μL),带滤芯的枪头。

5.1.220000r/min低温高速离心机。

5.1.3电热恒温水槽。

5.1.4稳流稳压电泳仪。

5.1.5水平电泳槽。

5.1.6凝胶成像系统。

5.1.7紫外透射反射分析仪。

5.1.8电磁炉。

5.1.9烧杯(1000mL)。

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5.1.10电子天平精度为：0.001g。

5.1.11PCR扩增仪。

5.1.12-20℃冰柜。

5.1.132℃~8℃冰箱。

5.2试剂

除另有规定外，所有生化试剂均为分析纯。

5.2.1蛋白酶K(见附录A.1)。

5.2.210%SDS液(见附录A.2)。

5.2.370%乙醇(见附录A.3)。

5.2.41.0%琼脂糖凝胶(见附录A.4)。

5.2.5DNAMarkerDL2000。

5.2.6超纯水：符合GB/T6682,三级。

5.2.7引物：

MS-Fwd:5-CGAGCGCAACCCTTCATAT-3;

MS-Rev:5-CTACCATTGTAGCACGTTTGCA-3;

扩增片段大小127bp。