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ICS67.060
B21
DB37
山东省地方标准
DB37/T3105—2018
向日葵种子纯度蛋白电泳检测标准
ThevarietypurityidentificationtechniqueofsunflowerseedswithPAGE
2018-02-02发布2018-03-02实施
山东省质量技术监督局发布
DB37/T3105—2018
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
本标准由山东省农业厅提出。
本标准由山东省农业标准化技术委员会归口。
本标准主要起草单位:山东农业大学、北京德农种业有限公司。
本标准起草人:张春庆、赵洪春、郑建鹏、温大兴、李岩。
本标准为首次发布。
I
DB37/T3105—2018
向日葵种子纯度蛋白电泳检测标准
1范围
本规程规定了蛋白质电泳的试剂配比、蛋白质提取、凝胶制备、电泳、染色、判别分析等技术要求。
本规程适用于向日葵品种及杂交种种子的纯度室内的快速鉴定。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB3543种子检验技术规程
GB20464农作物种子标签通则
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
杂交种
各种直接用于生产的杂交向日葵一代种子。
3.2
品种纯度
品种在特征特性方面典型一致的程度,用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。
3.3
标准样品
能够充分代表种或品种特征特性的种子样品,或具备指定特征、特性样品。
4原理
4.1不同品种遗传组成不同,在种子形成时期合成的蛋白质不同。
4.1.1不同的蛋白质由于分子大小、形状不同,在一定的pH条件下所带的电荷多少不同,因此在电场
作用下,在凝胶中移动的快慢不同,通过电泳可以把不同的蛋白质区分开,近而区分不同的亲本和杂交
种。
4.1.2利用该电泳技术,杂交种具有不育系和恢复系的双亲谱带,双亲有差异蛋白谱带是杂交种纯度
检测的关键位置。
1
DB37/T3105—2018
4.2蛋白谱带的命名方法:以点样孔为零点,在凝胶中部每个样品都含有的条带为50(图1),在0~
50之间细分为50等份作为标尺,50以下的部分按该标尺进行区分,读取泳道内所有蛋白指纹所处位置
的数值,记为蛋白质谱带名称。
图1蛋白质谱带命名示意图
5仪器与试剂
5.1仪器
单粒种子磨粉器,天平(感量0.0001g,0.001g),移液管(10mL),离心管(1.5mL),离心管
mL500mL1000mL),L~100μL),
架,容量瓶(100、、微量进样器(1μ
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