免疫学技术免疫检测.pptx

;;免疫学检测方法;第一节体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素;抗原抗体结合的特异性;抗原抗体结合的可逆性;适宜的抗原抗体浓度和比例;抗原抗体反应的两个阶段

;（二）抗原抗体反应的影响因素;根据抗原物理性状的差异或参加反应的其他辅助成分的不同，可出现不同类型的反应：

凝集反应

沉淀反应

免疫标记技术;1.凝集反应(Agglutination)

颗粒性抗原＋相应抗体凝集

可溶性抗原＋相应抗体不凝集

可溶性抗原—颗粒载体＋相应抗体凝集

常用载体

RBC

聚苯乙烯乳胶

活性碳

胶体金;凝集反应;2.沉淀反应precipitation;双向琼脂扩散;3.免疫标记技术(immunolabellingtechniques);(1)免疫酶测定法;酶联免疫吸附试验（ELISA）;如测血清中的抗HIV抗体;如测血清中的乙肝表面抗原;2）酶免疫组织化学技术;ＨＲＰ

底物分解成难溶性沉淀物（棕褐色）

（二氨基苯胺，ＤＡＢ）

优点：

可用普通光学显微镜观察；

酶标抗体染色后，标本还可用其他染料复染，以显示细胞形态或细胞核；

标本可以长期保存；

酶作用底物的分解产物为电子致密物质，也适合于作电镜观察；;（2）免疫荧光技术;（3）放射免疫测定法

Radioimmunoassay,RIA;第三节免疫细胞功能检测;（一）外周血中单个核细胞分离;人的红细胞密度为1.093;（二）淋巴细胞及其亚群的分离;2.荧光激活细胞分离仪分离法

又称为流式细胞术（Flowcytometry,FCM）

将光学流体力学、电子学和计算机等多种技术综合为一体，对单个细胞进行快速、灵敏、多参数的定量测定，并进行综合分析的一项技术。

需要流式细胞仪;流式细胞仪主要原理;（二）淋巴细胞及其亚群的分离;二、免疫细胞的功能测定;1.T细胞功能测定

;2.B细胞功能测定

;溶血空斑试验;3.细胞毒性试验;4.吞噬功能检测;5.细胞因子检测;ELISPOT