血清浆脂类及脂蛋白测定.pptVIP

血清（浆）脂类及脂蛋白测定——董雷鸣甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯)磷脂胆固醇和胆固醇酯非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等血脂的组成：血脂的运输形式—脂蛋白定义：指血浆脂质与载脂蛋白组成的可溶性的生物大分子。01磷脂胆固醇载脂蛋白02甘油三酯胆固醇酯03脂蛋白微粒04表面05核心2、结构：3、分类按密度不同HDLLDLIDLVLDLCM(2)按电泳时区带的泳动位置不同CMHDLVLDLLDLCMβ-LP前β-LPα-LP＋α-LP前β-LPβ-LPCM临床血脂测定的常见项目：实验51：磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）实验原理：02提取HDL测定胆固醇01超速离心法层析法电泳法沉淀法提取HDL的方法：沉淀法原理：沉淀↓ApoB+多阴离子化合物硫酸葡聚糖--Mg2+肝素--Mn2+磷钨酸--Mg2+多阴离子（polyanion）化合物过氧化物酶胆固醇+O2胆甾烯酮+H2O2H2O2+酚+4-氨基安替比林亚胺醌+H2O胆固醇测定（酶法）：试剂：沉淀剂酶试剂参考血清（TC测定用的定值血清）操作步骤：提取HDL取血清和沉淀剂各200μl，充分混匀，置室温放置10min后，2500r/min，15min，吸取上清液按表进行操作。加入物(μl)空白管标准管测定管上清液——50参考血清—50—蒸馏水50——酶试剂200020002000混匀，37℃水浴15min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。2、测定胆固醇计算：01参考值：02HDL-C(mmol/L)03测定管吸光度04标准管吸光度05×06=07定值血清胆固醇浓度0817099~2.0mmol/L10211——（在室温条件下，各型脂蛋白之间会发生脂质交换）；——（游离的胆固醇会不断酯化）。1、血清标本要及时测定——（温度过高使沉淀不完全）。2、离心过程中防止温度过高（室温15~25℃），离心后放置时间不能过长。注意事项：具有抗动脉粥样硬化作用，是冠心病的保护因素。临床意义：实验49：磷酸甘油氧化法测定血清甘油三酯（TG）甘油三酯(TG)的结构：化学法酶法甘油三酯测定的方法：化学法皂化（过碘酸）氧化（KOH）抽提甘油甲醛显色甘油三酯甘油甲醛变色酸紫红色*