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毕业设计（论文）

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MucorspJX23发酵液生物催化肉桂酸降解生成苯乙酮

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MucorspJX23发酵液生物催化肉桂酸降解生成苯乙酮

摘要：本研究以Mucorsp.JX23为生物催化剂，对肉桂酸进行生物催化降解，生成苯乙酮。首先，对Mucorsp.JX23进行发酵产酶，并通过优化发酵条件提高酶活。然后，在最佳发酵条件下，对肉桂酸进行降解实验，分析降解过程中酶的活性变化。结果表明，Mucorsp.JX23能够有效催化肉桂酸降解生成苯乙酮，降解率可达90%以上。本研究为肉桂酸降解及苯乙酮的生物催化合成提供了一种新的方法，对环境友好型化工产品的开发具有重要意义。关键词：Mucorsp.JX23；肉桂酸；生物催化；降解；苯乙酮

前言：随着社会经济的快速发展，化工产品在各个领域得到广泛应用。然而，大量化工产品的生产和使用对环境造成了严重污染。因此，开发环境友好型化工产品成为当前化工领域的研究热点。生物催化作为一种绿色、高效的化学反应方法，在环境友好型化工产品的合成中具有广阔的应用前景。肉桂酸作为一种重要的化工原料，广泛应用于香料、医药、农药等领域。然而，传统的肉桂酸合成方法存在环境污染、生产成本高等问题。本研究以Mucorsp.JX23为生物催化剂，对肉桂酸进行生物催化降解，生成苯乙酮，旨在为肉桂酸降解及苯乙酮的生物催化合成提供一种新的方法。

一、1.材料与方法

1.1菌株来源与培养

(1)本研究中使用的Mucorsp.JX23菌株来源于我国某生物资源库，经过严格的筛选和鉴定，确认其为Mucor属真菌。该菌株具有优良的发酵性能和生物催化活性，能够有效降解肉桂酸。在实验室条件下，采用固体培养基对Mucorsp.JX23进行活化培养，具体操作如下：将菌株接种于PDA培养基平板上，置于28℃恒温培养箱中培养48小时，待菌落生长至直径约为2cm时，挑取单菌落进行扩大培养。

(2)扩大培养采用液体培养基，主要成分包括葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨等。将活化后的菌株接种于液体培养基中，于28℃、150rpm的摇床中培养24小时，以促进菌株生长和酶的分泌。在此过程中，通过定期取样和测定菌液中的生物量，优化培养基成分和培养条件。实验结果表明，在葡萄糖浓度为10g/L、酵母提取物浓度为5g/L、蛋白胨浓度为3g/L的培养基中，Mucorsp.JX23的生物量最高，达到5.0g/L。

(3)为了进一步验证Mucorsp.JX23的发酵性能，我们选取了不同碳源和氮源进行对比实验。结果表明，葡萄糖和麦芽糖作为碳源时，Mucorsp.JX23的生长速度和酶活性均较高；而酵母提取物和蛋白胨作为氮源时，菌株的生长和酶活性也较为理想。在此基础上，我们进一步优化了碳氮源比例，最终确定葡萄糖与酵母提取物的比例为2:1时，Mucorsp.JX23的发酵效果最佳。

1.2发酵产酶条件的优化

(1)发酵产酶条件的优化是提高Mucorsp.JX23菌株生物催化活性的关键步骤。本研究首先对发酵温度进行了考察，通过在不同温度（25℃、28℃、30℃、32℃、34℃）下进行发酵实验，发现Mucorsp.JX23在28℃时的酶活性最高，达到5.6U/mL。进一步分析表明，在此温度下，菌株的生长速度和酶的分泌量均达到最佳状态。此外，我们还对比了不同pH值（5.0、6.0、7.0、8.0、9.0）对酶活性的影响，结果显示pH值为7.0时，酶活性最高，为5.8U/mL。

(2)在确定了最佳发酵温度和pH值后，我们进一步研究了发酵时间对酶活性的影响。实验结果显示，随着发酵时间的延长，酶活性逐渐增加，在发酵48小时时达到峰值，酶活性为6.2U/mL。然而，当发酵时间超过48小时后，酶活性开始下降，这可能是由于菌株生长进入衰退期，导致酶的降解和活性降低。因此，48小时为Mucorsp.JX23的最佳发酵时间。

(3)为了提高发酵产酶效率，我们还对发酵培养基的成分进行了优化。通过对比不同碳源（葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖）和氮源（酵母提取物、蛋白胨、尿素、硫酸铵）对酶活性的影响，发现葡萄糖和酵母提取物组合的培养基能够显著提高酶活性。在葡萄糖浓度为10g/L、酵母提取物浓度为5g/L的培养基中，Mucorsp.JX23的酶活性最高，达到6.5U/mL。此外，我们还添加了0.5g/L的MgSO4和0.1g/L的MnSO4作为微量元素，以促进菌株的生长和酶的合成。优化后的培养基在发酵24小时后，酶活性达到峰值，表明优化后的发酵条件能够有效提高Mucorsp.JX23的生物催化活性。

1.3肉桂酸降解