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高中生物选修人教版动物细胞工程 (2).ppt

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(3)整个制备过程为何要经过两次筛选?(第一次筛选得到杂交瘤细胞(多种),第二次需先在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的,所以产生的抗体必然是化学性质单一的,特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义,只不过克隆的不是B淋巴细胞,而是杂交瘤细胞。)第31页,共43页,星期日,2025年,2月5日关于高中生物选修人教版动物细胞工程(2)第1页,共43页,星期日,2025年,2月5日动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植动物细胞工程常用技术胚胎移植技术第2页,共43页,星期日,2025年,2月5日(一)动物细胞培养1.过程:第3页,共43页,星期日,2025年,2月5日动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬液细胞株细胞系(一)动物细胞培养细胞增值无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体细胞贴壁原代培养传代培养胰蛋白酶第4页,共43页,星期日,2025年,2月5日细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培养和传代培养?(一)动物细胞培养多数组织细胞固定在表面生长和分裂。随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变第5页,共43页,星期日,2025年,2月5日2、有关概念原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。第6页,共43页,星期日,2025年,2月5日2、有关概念细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。第7页,共43页,星期日,2025年,2月5日3、动物细胞培养条件1。无菌、无毒2。营养:葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素和动物血清等。3。温度:36.5+0.54。PH=7.2~7.45。气体环境:O2和CO2(95%空气+5%CO2)第8页,共43页,星期日,2025年,2月5日思考:2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?1、动物细胞培养液的主要成分是什么?较植物组培培养基有何独特之处?3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞?4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?主要成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有:1、液体培养基2、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂能力强成块组织不利培养,分散了做成细胞悬浮液利于培养不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体第9页,共43页,星期日,2025年,2月5日获得细胞细胞的全能性细胞株、细胞系植物体培养结果或细胞分泌蛋白快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较第10页,共43页,星期日,2025年,2月5日4.动物细胞培养技术的应用(1)大规模生产有重要价值的蛋白质生物制品。(2)解决为大面积烧伤病人移植皮肤问题。(利用贴壁生长和接触抑制原理)(3)检测有关物质毒性。(4)培养正常或病变细胞,用于科研。如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体第11页,共43页,星期日,2025年,2月5日(二)、动物体细胞核移植技术和克隆动物1.动物核移植(1)概念:将供体体细胞的_________与受体去核卵细胞的细胞质进行___________,借助于_________的发育能力,经过培养发育成胚胎进而形成__________的技术。(2)关键技术:_______________技术。细胞核人工组合卵细胞个体细胞核移植第12页,共43页,星期日,2025年,2月5日动物体细胞核移植技术和克隆动物(3)哺乳动物核移植可以分为__________核移植(比较容易)和__________核移植(比较难)

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